VO (EG) 440/2008
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| Artikel 1 |
| Artikel 2 |
| Artikel 3 |
| Artikel 4 |
| Anhang Methoden zur Bestimmung der .... |
| Teil 0 Internationale Prüfmethoden, die für die Gewinnung von Informationen über inhärente Stoffeigenschaften im Sinne der Verordnung (EG) Nr. 1907/2006 als geeignet anerkannt sind |
| Tabelle 1: Prüfmethoden für physikalisch-chemische Eigenschaften des Stoffes |
| Tabelle 2: Prüfmethoden für toxikologische Eigenschaften |
| Tabelle 3: Prüfmethoden für ökotoxikologische Eigenschaften |
| Teil A Physikalisch-chemische Eigenschaften |
| A.1 Schmelz-/Gefriertemperatur |
| 1. Methoden |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.4.1 Die Kapillarmethode |
| 1.4.1.1 Schmelztemperaturgeräte mit Flüssigkeitsbad |
| 1.4.1.2 Schmelztemperaturgeräte mit Metallblock |
| 1.4.1.3 Bestimmung mit Fotozelle |
| 1.4.2 Heiztische |
| 1.4.2.1 Kofler-Heizbank |
| 1.4.2.2 Das Schmelzmikroskop |
| 1.4.2.3 Die Meniskusmethode |
| 1.4.3 Methode zur Bestimmung der Gefriertemperatur |
| 1.4.4 Thermische Analyse |
| 1.4.4.1 Differentialthermoanalyse (DTA) |
| 1.4.4.2 Differentialscanningkalorimetrie (DSK) |
| 1.4.5 Stockpunkt |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| Tabelle: Anwendbarkeit der beschriebenen Methoden |
| A. Kapillarmethoden |
| B. Heiztische und Gefriertemperaturbestimmungen |
| C. Thermische Analyse |
| D. Stockpunkt |
| 1.6 Beschreibung der Methoden |
| 1.6.1 Methoden mit Kapillarrohr |
| Abbildung 1 |
| 1.6.1.1 Schmelztemperaturbestimmungsgeräte mit Flüssigkeitsbad |
| Abbildung 2 |
| 1.6.1.2 Schmelztemperaturbestimmungsgeräte mit Metallblock |
| Abbildung 3 |
| 1.6.1.3 Bestimmung mit Fotozelle (automatisch) |
| 1.6.2 Heiztische |
| 1.6.2.1 Kofler-Heizbank |
| 1.6.2.2 Schmelzmikroskop |
| 1.6.2.3 Meniskusmethode (Polyamide) |
| 1.6.3 Methoden zur Bestimmung der Gefriertemperatur |
| 1.6.4 Thermoanalyse |
| 1.6.4.1 Differentialthermoanalyse |
| 1.6.4.2 Differentialscanningkalorimetrie |
| 1.6.5 Stockpunktbestimmung |
| 2. Daten |
| 3. Abschlussbericht |
| 4. Literatur |
| Anlage |
| 1. Kapillarmethoden |
| 1.1 Schmelztemperaturbestimmungsgeräte mit Flüssigkeitsbad |
| 1.2 Schmelztemperaturbestimmungsgeräte mit Metallblock |
| 2. Heiztische |
| 2.1 Kofler-Heizbank |
| 2.2 Schmelzmikroskop |
| 2.3 Meniskusmethode (Polyamide) |
| 3. Methoden zur Gefriertemperaturbestimmung |
| 4. Thermoanalyse |
| 4.1 Differentialthermoanalyse |
| 4.2 Differentialscanningkalorimetrie |
| 5. Stockpunktbestimmung |
| A.2 Siedetemperatur |
| 1. Methoden |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.4.1 Bestimmung mit dem Ebulliometer |
| 1.4.2 Dynamische Methode |
| 1.4.3 Destillationsmethode für die Siedetemperatur |
| 1.4.4 Verfahren nach Siwoloboff |
| 1.4.5 Fotozellendetektion |
| 1.4.6 Differentialthermoanalyse |
| 1.4.7 Differentialscanningkalorimetrie |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| Tabelle 1: Vergleich der Methoden |
| 1.6 Beschreibung der Methoden |
| 1.6.1 Ebulliometer |
| 1.6.2 Dynamische Methode |
| 1.6.3 Destillationsverfahren (Siedebereich) |
| 1.6.4 Verfahren nach Siwoloboff |
| Abbildung 1 |
| Abbildung 2 Prinzip nach Siwoloboff |
| Abbildung 3 Modifiziertes Prinzip |
| 1.6.5 Fotozellendetektion |
| 1.6.6 Thermoanalyse |
| 1.6.6.1 Differentialthermoanalyse |
| 1.6.6.2 Differentialscanningkalorimeter |
| 2. Daten |
| Tabelle 2: Temperatur-Korrekturfaktoren fT |
| 3. Abschlussbericht |
| 4. Literatur |
| Anlage |
| 1. Ebulliometer |
| 1.1 Schmelztemperaturbestimmungsgeräte mit Flüssigkeitsbad |
| 2. Destillationsverfahren (Siedebereich) |
| 3. Differentialthermoanalyse und Differentialscanningkalorimetrie |
| A.3 Relative Dichte |
| 1. Methoden |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methoden |
| 1.4.1 Auftriebsmethoden |
| 1.4.1.1 Aräometer (für Flüssigkeiten) |
| 1.4.1.2 Hydrostatische Waage (für Flüssigkeiten und Feststoffe) |
| 1.4.1.3 Tauchkörpermethode (für Flüssigkeiten) |
| 1.4.2 Pyknometer-Methoden |
| 1.4.3 Luftvergleichspyknometer (für Feststoffe) |
| 1.4.4 Schwingungsdichtemesser |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methoden |
| 2. Daten |
| 3. Abschlussbericht |
| Tabelle Anwendbarkeit der Methoden |
| 4. Literatur |
| Anlage |
| 1. Auftriebsmethoden |
| 1.1 Aräometer |
| 1.2 Hydrostatische Waage |
| 1.3 Tauchkörpermethode |
| 2. Pyknometer-Methoden |
| 2.1 Für Flüssigkeiten: |
| 2.2 Für Feststoffe: |
| 3. Luftvergleichspyknometer |
| A.4 Dampfdruck |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Begriffsbestimmungen und Einheiten |
| 1.3 Prinzip der Prüfmethode |
| Tabelle 1 |
| 1.4 Referenzsubstanzen |
| 1.5 Beschreibung der Methode |
| 1.5.1 Dynamische Methode (Cottrell-Verfahren) |
| 1.5.1.1 Prinzip |
| Abbildungen 1, 2 |
| 1.5.1.2 Apparatur |
| 1.5.1.3 Verfahren |
| 1.5.2 Statische Methode |
| 1.5.2.1 Prinzip |
| 1.5.2.2 Apparatur |
| 1.5.2.3 Verfahren |
| Abbildung 3a 3b |
| 1.5.3 Isoteniskopmethode |
| 1.5.3.1 Prinzip |
| 1.5.3.2 Apparatur |
| 1.5.3.3 Verfahren |
| Abbildung 4 |
| 1.5.4 Effusionsmethode: Dampfdruckgleichgewicht |
| 1.5.4.1 Prinzip |
| 1.5.4.2 Apparatur |
| 1.5.5 Effusionsmethode: Knudsen-Zelle |
| 1.5.5.1 Prinzip |
| 1.5.5.2 Apparatur |
| 1.5.6 Effusionsmethode: isotherme Thermogravimetrie |
| 1.5.6.1 Prinzip |
| 1.5.6.2 Apparatur |
| 1.5.6.3 Verfahren |
| 1.5.7 Gassättigungsmethode |
| 1.5.7.1 Prinzip |
| 1.5.7.2 Apparatur |
| Abbildung 8 |
| Abbildung 9, 10 |
| 1.5.7.3 Verfahren |
| 1.5.8 Rotationsmethode |
| 1.5.8.1 Prinzip |
| 1.5.8.2 Apparatur |
| 2. Daten und Abschlussbericht |
| 2.1 Daten |
| 2.2 Prüfbericht |
| 3. Literatur |
| Anlage Schätzmethode |
| A.5 Oberflächenspannung |
| 1. Methoden |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definition und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methoden |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methoden |
| 1.6.1 Plattenmethode |
| 1.6.2 Bügelmethode |
| 1.6.3 Ringmethode |
| 1.6.4 OECD-Ringmethode |
| 1.6.4.1 Apparatur |
| 1.6.4.1.1 Beweglicher Probentisch |
| 1.6.4.1.2 Kraftmesssystem |
| 1.6.4.1.3 Messkörper (Ring) |
| Abbildung Messkörper (alle Abmessungen in mm) |
| 1.6.4.1.4 Messgefäß |
| 1.6.4.2 Vorbereitung der Apparatur |
| 1.6.4.2.1 Reinigung |
| 1.6.4.2.2 Eichung der Apparatur |
| 1.6.4.3 Vorbereitung der Proben |
| 1.6.5 Prüfbedingungen |
| 1.6.6 Durchführung der Prüfung |
| 2. Daten |
| Tabelle Korrektur der gemessenen Oberflächenspannungswerte |
| 3. Abschlussbericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 3.2 Interpretation der Ergebnisse |
| 4. Literatur |
| A.6 Wasserlöslichkeit |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Definitionen und Einheiten |
| Referenzsubstanzen |
| Beschreibung der Methoden |
| Prüfbedingungen |
| Vorversuch |
| Tabelle 1 |
| Säulen-Elutions-Methode |
| Abbildung 1 |
| Abbildung 2 |
| Abbildung 3 |
| Kolben-Methode |
| Analytische Bestimmungen |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur: |
| A.8 Verteilungskoeffizient |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.4.1 Schüttelmethode |
| 1.4.2 HPLC-Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.5.1 Wiederholbarkeit |
| 1.5.2 Empfindlichkeit |
| 1.5.3 Anwendbarkeit |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Abschätzung des Verteilungskoeffizienten |
| 1.6.2 Schüttelmethode |
| 1.6.2.1 Vorbereitung |
| 1.6.2.1.1 Vorsättigung der Lösungsmittel |
| 1.6.2.1.2 Vorbereitung der Prüfung |
| 1.6.2.1.3 Prüfsubstanz |
| 1.6.2.2 Prüfbedingungen |
| 1.6.2.3 Messverfahren |
| 1.6.2.3.1 Einstellen des Verteilungsgleichgewichts |
| 1.6.2.3.2 Phasentrennung |
| 1.6.2.4 Analyse |
| 1.6.3 HPLC-Methode |
| 1.6.3.1 Vorbereitung |
| 1.6.3.2 Messung |
| 2. Daten |
| 3. Abschlussbericht |
| 4. Literatur |
| Anlage 1 Berechnungs-/Schätzverfahren |
| Anlage 2 Empfohlene Referenzsubstanzen für die HPLC-Methode |
| A.9 Flammpunkt |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.5.1 Wiederholbarkeit |
| 1.5.2 Empfindlichkeit |
| 1.5.3 Anwendbarkeit |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Vorbereitungen |
| 1.6.2 Versuchsbedingungen |
| 1.6.3 Versuchsausführung |
| 1.6.3.1 Gleichgewichtsmethode |
| 1.6.3.2 Nicht-Gleichgewichtsmethode |
| 2. Daten |
| 3. Bericht |
| 4. Literatur |
| A.10 Entzündlichkeit (Feste Stoffe) |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Vorversuch |
| 1.6.2 Prüfung der Brenngeschwindigkeit |
| 1.6.2.1 Vorbereitung |
| 1.6.2.2 Versuchsbedingungen |
| 1.6.2.3 Versuchsausführung |
| 2. Daten |
| 3. Bericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 3.2 Interpretation der Ergebnisse |
| 4. Literatur |
| Anlage |
| Abbildung Form und Zubehör zur Herstellung der Schüttung |
| A.11 Entzündlichkeit (Gase) |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definition und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Gerät |
| 1.6.2 Versuchsbedingungen |
| 1.6.3 Versuchsausführung |
| 2. Daten |
| 3. Bericht |
| 4. Literatur |
| A.12 Entzündlichkeit (Berührung mit Wasser) |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Prinzip der Methode |
| 1.3.1 Stufe 1 |
| 1.3.2 Stufe 2 |
| 1.3.3 Stufe 3 |
| 1.3.4 Stufe 4 |
| 1.4 Referenzsubstanzen |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Stufe 1 |
| 1.6.1.1 Versuchsbedingungen |
| 1.6.1.2 Versuchsausführung |
| 1.6.2 Stufe 2 |
| 1.6.2.1 Gerät |
| 1.6.2.2 Versuchsbedingungen |
| 1.6.2.3 Versuchsausführung |
| 1.6.3 Stufe 3 |
| 1.6.3.1 Versuchsbedingungen |
| 1.6.3.2 Versuchsausführung |
| 1.6.4 Stufe 4 |
| 1.6.4.1 Gerät |
| 1.6.4.2 Versuchsbedingungen |
| 1.6.4.3 Versuchsausführung |
| 2. Daten |
| 3. Bericht |
| 4. Literatur |
| Anlage |
| Abbildung Apparatur |
| A.13 Pyrophore Eigenschaften von festen und flüssigen Stoffen |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Gerät |
| 1.6.2 Versuchsausführung |
| 2. Daten |
| 2.1 Folgerung aus den Ergebnissen |
| 2.2 Auswertung |
| 3. Bericht |
| 4. Literatur |
| A.14 Explosionsgefahr |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.4.1 Prüfung auf die Sicherheit des Umgangs mit der Substanz |
| 1.4.2 Thermische Empfindlichkeit |
| 1.4.3 Mechanische Empfindlichkeit (Schlag) |
| 1.4.4 Mechanische Empfindlichkeit (Reibung) |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Thermische Empfindlichkeit (Flammenzündung) |
| 1.6.1.1 Apparatur |
| 1.6.1.2 Versuchsbedingungen |
| 1.6.1.3 Versuchsausführung |
| 1.6.1.4 Auswertung |
| 1.6.2 Mechanische Empfindlichkeit (Schlag) |
| 1.6.2.1 Apparatur (Abbildung 4) |
| 1.6.2.2 Versuchsbedingungen |
| 1.6.2.3 Versuchsausführung |
| 1.6.2.4 Auswertung |
| 1.6.3 Mechanische Empfindlichkeit (Reibung) |
| 1.6.3.1 Apparatur (Abbildung 5) |
| 1.6.3.2 Versuchsbedingungen |
| 1.6.3.3 Versuchsausführung |
| 1.6.3.4 Auswertung |
| 2. Daten |
| 3. Bericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 3.2 Interpretation und Bewertung der Ergebnisse |
| 4. Literatur |
| Anlage Beispiel für Werkstoffspezifikation zur Prüfung auf thermische Empfindlichkeit (vgl. DIN 1623) |
| Abbildung 1 Apparatur für die Prüfung auf thermische Empfindlichkeit |
| Abbildung 2 Prüfung auf thermische Empfindlichkeit |
| Abbildung 3 Kalibrierung der Heizgeschwindigkeit für die Prüfung auf thermische Empfindlichkeit |
| Abbildung 4 Apparatur zur Prüfung auf Schlagempfindlichkeit |
| Abbildung 5 Apparatur zur Prüfung auf Reibempfindlichkeit |
| A.15 Zündtemperatur (Flüssigkeiten und Gase) |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Geräte |
| 1.6.2 Versuchsbedingungen |
| 1.6.3 Versuchsausführung |
| 2. Daten |
| 3. Bericht |
| 4. Literatur |
| A.16 Relative Selbstentzündungstemperatur für Feststoffe |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definition und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Gerät |
| 1.6.1.1 Ofen |
| 1.6.1.2 Drahtnetz-Kubus |
| 1.6.1.3 Thermoelemente |
| 1.6.1.4 Registriergerät |
| 1.6.2 Versuchsbedingungen |
| 1.6.3 Versuchsausführung |
| 2. Daten |
| 3. Bericht |
| 4. Literatur |
| Abbildung 1 Muster des Testkubus (Kantenlänge 20 mm) |
| Abbildung 2 Typische Temperatur/Zeit-Kurve |
| A.17 Brandfördernde Eigenschaften (Feststoffe) |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanz |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Vorbereitung |
| 1.6.1.1 Prüfsubstanz |
| 1.6.1.2 Brennbare Substanz |
| 1.6.1.3 Zündquelle |
| 1.6.2 Versuchsausführung |
| 1.6.2.1 Vorversuch |
| 1.6.2.2 Hauptversuch |
| 2. Daten |
| 3. Bericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 3.2 Interpretation des Ergebnisses |
| 4. Literatur |
| Anlage |
| Abbildung Form und Zubehör zur Herstellung der Schüttung |
| A.18 Zahlengemittelte Molmasse und Molmassenverteilung von Polymeren |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Testmethode |
| 1.6.1 Vorbereitung der Standardpolystyrollösungen |
| 1.6.2 Vorbereitung der Probelösung |
| 1.6.3 Apparatur |
| 1.6.4 Injektion und Lösungsmittelzugabesystem |
| 1.6.5 Säule |
| 1.6.6 Theoretische Böden |
| 1.6.7 Trennleistung |
| 1.6.8 Lösungsmittel |
| 1.6.9 Temperaturkontrolle |
| 1.6.10 Detektor |
| 2. Daten und Berichterstattung |
| 2.1 Daten |
| 2.2 Prüfbericht |
| 2.2.1 Prüfsubstanz |
| 2.2.2 Instrumentierung |
| 2.2.3 Systemkalibrierung |
| 2.2.4 Auswertung |
| 3. Literaturhinweise |
| Anlage Beispiele anderer Methoden zur Bestimmung der zahlengemittelten Molmasse (Mn) von Polymeren |
| 1. Nutzung kolligativer Eigenschaften |
| 1.1 Ebullioskopie/Kryoskopie |
| 1.2 Dampfdruckerniedrigung |
| 1.3 Membranosmometrie |
| 1.4 Dampfphasen-Osmometrie |
| 2. Endgruppen-Analyse |
| A.19 Niedermolekularer Anteil von Polymeren |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.6.1 Vorbereitung der Standardpolystyrollösungen |
| 1.6.2 Vorbereitung der Probelösung |
| 1.6.3 Berichtigungen aufgrund von Verunreinigungen und Zusatzstoffen |
| 1.6.4 Apparatur |
| 1.6.5 Injektion und Lösungsmittelzugabesystem |
| 1.6.6 Säule |
| 1.6.7 Theoretische Böden |
| 1.6.8 Trennleistung |
| 1.6.9 Lösungsmittel |
| 1.6.10 Temperaturkontrolle |
| 1.6.11 Detektor |
| 2. Daten und Berichterstattung |
| 2.1 Daten |
| 2.2 Prüfbericht |
| 2.2.1 Prüfsubstanz |
| 2.2.2 Instrumentierung |
| 2.2.3 Systemkalibrierung |
| 2.2.4 Angaben zum niedermolekularen Anteil |
| 2.2.5 Auswertung |
| 3. Literaturhinweise |
| Anlage Korrektur des niedermolekularen Anteils um unlösliche Polymerfraktionen |
| A.20 Lösungs-/Extraktionsverhalten von Polymeren in Wasser |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Referenzsubstanzen |
| 1.3 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.4 Qualitätskriterien |
| 1.5 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.5.1 Ausstattung |
| 1.5.2 Probenvorbereitung |
| 1.5.3 Verfahren |
| 1.5.4 Analyse |
| 1.5.4.1 Test mit einer Probengröße |
| 1.5.4.2 Test mit zwei unterschiedlichen Probengrößen |
| 2. Daten |
| 2.1 Test mit einer Probengrösse |
| 2.2 Test mit zwei unterschiedlichen Probengrössen |
| 3. Abschlussbericht |
| 3.1 Testbericht |
| 3.1.1 Prüfsubstanz |
| 3.1.2 Versuchsbedingungen |
| 3.1.3 Ergebnisse |
| 4. Hinweise |
| A.21 Brandfördernde Eigenschaften (Flüssige Stoffe) |
| 1. Verfahren |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzstoff |
| 1.4 Prinzip des Prüfverfahrens |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung des Verfahrens |
| 1.6.1 Vorbereitung |
| 1.6.1.1 Brennbarer Stoff |
| 1.6.1.2 Apparatur |
| 1.6.1.2.1 Druckgefäß |
| 1.6.1.2.2 Zündvorrichtung |
| 1.6.2 Durchführung des Tests |
| 2. Daten |
| 2.1 Ergebnisverarbeitung |
| Tabelle 1: Ergebnisbeispiele |
| 3. Bericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 3.2 Analyse der Ergebnisse |
| 4. Bezugsdokumente |
| Abbildung 1 Druckgefäß |
| Abbildung 2 Ständer |
| Abbildung 3 Zündvorrichtung |
| A.22 Längengewichteter mittlerer geometrischer Durchmesser von Fasern |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Begriffsbestimmungen |
| 1.3 Umfang und Einschränkungen |
| 1.4 Prinzip der Testmethode |
| 1.5 Beschreibung der Testmethode |
| 1.5.1 Sicherheits-Vorsichtsmaßnahmen |
| 1.5.2 Geräte/Apparatur |
| 1.5.3 Testverfahren |
| 1.5.3.1 Probenahme |
| 1.5.3.2 Vorbereitung der Probe |
| 1.5.3.3 Kalibrierung und Betrieb des REM |
| 1.5.3.3.1 Kalibrierung |
| 1.5.3.3.2 Betrieb |
| 1.5.3.4 Größenbestimmung |
| 1.5.3.4.1 Bewertung der Probe bei geringer Vergrößerung |
| 1.5.3.4.2 Längengewichtung der Faserdurchmesser |
| 1.5.3.4.3 Bestimmung der Fasergröße |
| 2. Daten |
| 2.1 Behandlung der Ergebnisse |
| 3. Berichtserstellung |
| 4. Literatur |
| A.23 1-Octanol/Wasser-Verteilungskoeffizient: Methode zur Prüfung unter langsamem Rühren |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Bedeutung und Anwendung |
| Anwendungsbereich |
| Definitionen und Einheiten |
| Prinzip der Methode |
| Anwendbarkeit der Prüfmethode |
| Informationen zur Prüfsubstanz |
| Beschreibung der Methode |
| Geräte und Apparatur |
| Herstellung der Prüflösungen |
| Extraktion und Analyse der Proben |
| Durchführung der Prüfung |
| Daten und Berichterstattung |
| Auswertung der Ergebnisse |
| Prüfbericht |
| Literatur |
| Anlage 1 Tabelle zur Berechnung der für den Nachweis von prüßubstanzen mit unterschiedlichen logPOW-Werten in der wässrigen Phase mindestens erforderlichen Volumina |
| Anlage 2 Beispiel eines Prüfgefäßes mit Glasmantel zur Bestimmung von POW unter langsamem Rühren |
| A.24 Verteilungskoeffizient (N-Octanol/Wasser), Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie (HPLC-Methode) |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Methode |
| Informationen zum Prüfstoff |
| Qualitätskriterien |
| Referenzstoffe Tabelle 1: Empfohlene Referenzstoffe |
| Beschreibung der Methode |
| Vorabschätzung des Verteilungskoeffizienten |
| Gerät |
| Mobile Phase |
| Gelöste Stoffe |
| Prüfbedingungen |
| Bestimmung der Totzeit t0 |
| Regressionsgleichung |
| Bestimmung des Pow-Wertes des Prüfstoffs |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage Methoden zur Berechnung von Pow-Werten |
| Einleitung |
| Prinzip der Berechnungsverfahren |
| Zuverlässigkeit berechneter Werte |
| Fujita-Hansch'sche π-Methode |
| Rekker-Methode |
| Hansch-Leo-Methode |
| Kombinierte Methode |
| Literatur zu Berechnungsmethoden |
| A.25 Dissoziationskonstanten in Wasser (Titrationsverfahren - Spektrofotometrisches Verfahren - Konduktometrisches Verfahren) |
| Einleitung |
| Methode - Einleitung, Zweck, Anwendungsbereich, Relevanz, Anwendung und Versuchsgrenzen |
| Definitionen und Einheiten |
| Referenzsubstanzen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Qualitätskriterien |
| Beschreibung der Prüfverfahren |
| Vorbereitungen |
| Testlösungen |
| Prüfbedingungen |
| Temperatur |
| Analysen |
| Durchführung des Tests |
| Titrationsverfahren |
| Spektrofotometrisches Verfahren |
| Konduktometrisches Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Ergebnisauswertung |
| Titrationsverfahren |
| Spektrofotometrisches Verfahren |
| Konduktometrisches Verfahren |
| Prüfbericht |
| Literaturhinweise |
| Teil B Toxizität und sonstiger Auswirkungen auf die Gesundheit |
| Allgemeine Einleitung |
| A. Charakterisierung der Prüfsubstanz |
| B. Tierpflege |
| C. Alternative Prüfmethoden |
| D. Bewertung und Interpretation |
| E. Literaturhinweise |
| B.1 bis - Akute orale Toxizität - Fest-Dosis-Methode |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.4 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.4.1 Auswahl der Tierspezies |
| 1.4.2 Haltung und Fütterung |
| 1.4.3 Vorbereitung der Versuchstiere |
| 1.4.4 Vorbereitung der Dosen |
| 1.5 Verfahrensweise |
| 1.5.1 Verabreichung der Dosen |
| 1.5.2 Vorstudie |
| 1.5.3 Hauptstudie |
| 1.5.3.1 Anzahl der Versuchstiere und Dosierung |
| 1.5.3.2 Limit-Test |
| 1.6 Beobachtungen |
| 1.6.1 Körpergewicht |
| 1.6.2 Pathologie |
| 2. Daten |
| 3. Bericht |
| 3.1 Testbericht |
| 4. Literatur |
| Anlage |
| Anlage 1 Prüfverfahren für die Vorstudie |
| Anlage 2 Prüfverfahren für die Hauptstudie |
| Anlage 3 Kriterien für die Klassifizierung von Testsubstanzen mit erwarteten LD50-Werten über 2.000 mg/kg ohne erforderliche Tests |
| Anlage 4 Prüfmethode B.1 bis |
| B.1.tris Akute orale Toxizität - Akut-toxische Klassenmethode |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Prinzip der Prüfmehode |
| 1.4 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.4.1 Auswahl der Tierspezies |
| 1.4.2 Haltung und Fütterung |
| 1.4.3 Vorbereitung der Versuchstiere |
| 1.4.4 Vorbereitung der Dosen |
| 1.5 Verfahrensweise |
| 1.5.1 Verabreichung der Dosen |
| 1.5.2 Anzahl der Versuchstiere und Dosierung |
| 1.5.3 Limit-Test |
| 1.6 Beobachtungen |
| 1.6.1 Körpergewicht |
| 1.6.2 Pathologie |
| 2. Daten |
| 3. Bericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 4. Literaturhinweise |
| Anlagen |
| Be Vorgehensweise für alle Startdosen |
| Anlage 1A Prüfverfahren bei einer Startdosis von 5 mg pro kg Körpergewicht |
| Anlage 1B Prüfverfahren bei einer Startdosis von 50 mg pro kg Körpergewicht |
| Anlage 1C Prüfverfahren bei einer Startdosis von 300 mg pro kg Körpergewicht |
| Anlage 1D Prüfverfahren bei einer Startdosis von 2.000 mg pro kg Körpergewicht |
| Anlage 2 Kriterien für die Klassifizierung von Testsubstanzen mit erwarteten LD50-Werten über 2.000 mg/kg ohne erforderliche Tests |
| Anlage 3 Prüfverfahren B.1 tris |
| B.2 Akute Inhalationstoxizität |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Methode |
| Auswahl von Versuchstierarten |
| Vorbereitung der Tiere |
| Tierhaltung |
| Inhalationskammern |
| Expositionsbedingungen |
| Verabreichung der Konzentrationen |
| Partikelgrößenverteilung |
| Vorbereitung der Prüfsubstanz in einem Vehikel |
| Kontrolltiere |
| Überwachung der Expositionsbedingungen |
| Luftstrom in der Inhalationskammer |
| Temperatur und relative Luftfeuchtigkeit in der Inhalationskammer |
| Prüfsubstanz: nominale Konzentration |
| Prüfsubstanz: tatsächliche Konzentration |
| Prüfsubstanz: Partikelgrößenverteilung |
| Verfahren |
| Traditionelles Protokoll |
| Allgemeine Überlegungen: traditionelles Protokoll |
| Vorstudie: traditionelles Protokoll |
| Limit-Test: traditionelles Protokoll |
| Hauptstudie: traditionelles Protokoll |
| Konzentration-x-Zeit-Protokoll (C x T) |
| Allgemeine Überlegungen: C-x-t-Prokokoll |
| Vorstudie: C-x-t-Protokoll |
| Ausgangskonzentration: C-x-t-Protokoll |
| Hauptstudie: C-x-t-Protokoll |
| Beobachtungen |
| Körpergewicht |
| Pathologie |
| Daten und Berichterstattung |
| Daten |
| Prüfbericht |
| Versuchstiere und Tierhaltung |
| Prüfsubstanz |
| Vehikel |
| Inhalationskammer |
| Expositionsdaten |
| Prüfbedingungen |
| Ergebnisse |
| Diskussion und Auswertung der Ergebnisse |
| Literatur |
| Definition |
| Anlage 1 C-x-t-Protokoll |
| Abbildung 1 Hypothetische Darstellung einer Konzentrations-Zeit-Mortalitäts-Beziehung bei Ratten |
| B.3 Akute Toxizität (dermal) |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Bezugssubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Vorbereitung |
| 1.6.2 Prüfbedingungen |
| 1.6.2.1 Versuchstiere |
| 1.6.2.2 Anzahl und Geschlecht |
| 1.6.2.3 Dosierungen |
| 1.6.2.4 Limit-Test |
| 1.6.2.5 Beobachtungszeitraum |
| 1.6.3 Versuchsdurchführung |
| 2. Daten |
| 3. Abschlussbericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 3.2 Bewertung und Interpretation |
| 4. Literatur |
| B.4 Akute Hautreizung/-verätzung |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der In-vivo-Prüfung |
| Vorbereitung der In-vivo-Prüfung |
| Auswahl von Versuchstierarten |
| Vorbereitung der Versuchstiere |
| Haltungs- und Fütterungsbedingungen |
| Prüfverfahren |
| Applikation der Prüfchemikalie |
| Dosierung |
| Vorversuch (Invivo-Prüfung auf Hautreizung/-verätzung an einem Tier) |
| Bestätigungsprüfung (Invivo-Prüfung auf hautreizende Wirkungen an zusätzlichen Tieren) |
| Beobachtungszeitraum |
| Klinische Beobachtungen und Bewertung von Hautreaktionen |
| Daten und Berichterstattung |
| Auswertung der Ergebnisse |
| Prüfbericht |
| Begründung für die Invivo-Prüfung |
| Prüfchemikalie |
| Vehikel |
| Versuchstier(e) |
| Prüfbedingungen |
| Ergebnisse |
| Diskussion der Ergebnisse |
| Schlussfolgerungen |
| Literatur |
| Tabelle Bewertung von Hautreaktionen |
| Anlage Begriffsbestimmungen |
| B.5 Akute Augenreizung/-verätzung |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip des In-vivo-Tests |
| Vorbereitung des In-vivo-Tests |
| Auswahl der Tierart |
| Vorbereitung der Versuchstiere |
| Haltungs- und Fütterungsbedingungen |
| Prüfverfahren |
| Verwendung topischer Anästhetika und systemischer Analgetika |
| Applikation der Prüfchemikalie |
| Ausspülen |
| Dosierung |
| Vorversuch (In-vivo-Test auf Augenreizung/-verätzung an einem einzigen Tier) |
| Bestätigungstest (In-vivo-Test auf augenreizende Wirkungen an zusätzlichen Tieren) |
| Beobachtungszeitraum |
| Klinische Beobachtungen und Einstufung von Augenreaktionen |
| Daten und Berichterstattung |
| Ergebnisauswertung |
| Prüfbericht |
| Begründung für den In-vivo-Test |
| Prüfchemikalie |
| Vehikel |
| Versuchstiere |
| Anästhetika und Analgetika |
| Ergebnisse |
| Diskussion der Ergebnisse |
| Interpretation der Ergebnisse |
| Literaturhinweise |
| Tabelle 1 Einstufung von Augenschädigungen |
| Anlage Definitionen |
| Ergänzung zur Prüfmethode B.5 |
| Sequenzielle Strategie für die Prüfung auf Augenreizungen und Augenverätzungen |
| Allgemeine Überlegungen |
| Beschreibung der stufenweisen Prüfstrategie |
| Prüf- und Bewertungsstrategie: Augenreizung/-verätzung |
| Literaturhinweise |
| B.6 Sensibilisierung der Haut |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Bezugssubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.5 Beschreibung der Prüfmethoden |
| 1.5.1 Meerschweinchen-Maximierungstest (GPMT) |
| 1.5.1.1 Vorbereitungen |
| 1.5.1.2 Versuchsbedingungen |
| 1.5.1.2.1 Versuchstiere |
| 1.5.1.2.2 Anzahl und Geschlecht |
| 1.5.1.2.3 Dosierungen |
| 1.5.1.3 Versuchsdurchführung |
| 1.5.1.3.1 Induktion |
| 1.5.1.3.2 Provokation |
| 1.5.1.3.3 Beobachtung und Bewertung: behandelte Gruppe und Kontrollgruppe |
| 1.5.2 Bühler-Test |
| 1.5.2.1 Vorbereitungen |
| 1.5.2.2 Versuchsbedingungen |
| 1.5.2.2.1 Versuchstiere |
| 1.5.2.2.2 Anzahl und Geschlecht |
| 1.5.2.2.3 Dosierungen |
| 1.5.2.3 Versuchsdurchführung |
| 1.5.2.3.1 Induktion Tag 0 - behandelte Gruppe |
| 1.5.2.3.2 Provokation |
| 1.5.2.3.3 Beobachtung und Bewertung |
| 2. Daten (GPMT und Bühlertest) |
| 3. Abschlussbericht (GPMT und Bühlertest) |
| 4. Literatur |
| Anlage |
| Tabelle Bewertungsskala nach Magnusson/Kligman für Reaktionen auf Provokations-Läppentests |
| B.7 28-Tage-Toxizitätsstudie mit wiederholter oraler Verabreichung an Nagetieren |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen und Begrenzungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Methode |
| Auswahl von Versuchstierarten |
| Haltung und Fütterung |
| Vorbereitung der Tiere |
| Herstellung der Dosen |
| Verfahren |
| Zahl und Geschlecht der Versuchstiere |
| Dosierung |
| Limit-Test |
| Verabreichung der Dosen |
| Beobachtungen |
| Körpergewicht und Futter-/Trinkwasseraufnahme |
| Hämatologische Untersuchung |
| Klinisch-biochemische Untersuchungen |
| Pathologie |
| Makroskopische Untersuchung |
| Histopathologie |
| Daten und Berichterstattung |
| Daten |
| Prüfbericht |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Empfohlene Endpunkte für den Nachweis endokriner Disruptoren in dieser Prüfmethode b.7 |
| Literatur |
| B.8 Prüfung auf subakute Toxizität nach Inhalation - 28-Tage-Test |
| Zusammenfassung |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Beschreibung der Methode |
| Auswahl von Versuchstierarten |
| Vorbereitung der Tiere |
| Tierhaltung |
| Inhalationskammern |
| Toxizitätsstudien |
| Grenzkonzentrationen |
| Dosisfindungsstudie |
| Hauptstudie |
| Satellitenstudie (Reversibilität) |
| Kontrolltiere |
| Expositionsbedingungen |
| Verabreichung der Konzentrationen |
| Partikelgrößenverteilung |
| Vorbereitung der Prüfsubstanz in einem Vehikel |
| Überwachung der Expositionsbedingungen |
| Luftstrom in der Inhalationskammer |
| Temperatur und relative Luftfeuchtigkeit in der Inhalationskammer |
| Prüfsubstanz: nominale Konzentration |
| Prüfsubstanz: tatsächliche Konzentration |
| Prüfsubstanz: Partikelgrößenverteilung |
| Beobachtungen |
| Körpergewicht |
| Futter- und Wasseraufnahme |
| Klinische Pathologie |
| Tabelle 1: Klinische Standardpathologieparameter |
| Makroskopische Pathologie und Organgewichte |
| Tabelle 2: Bei der Nekropsie aufbewahrte Organe und Gewebe |
| Histopathologie |
| Daten und Berichterstattung |
| Daten |
| Prüfbericht |
| Versuchstiere und Tierhaltung |
| Prüfsubstanz |
| Vehikel |
| Inhalationskammer |
| Expositionsdaten |
| Prüfbedingungen |
| Ergebnisse |
| Diskussion und Auswertung der Ergebnisse |
| Literatur |
| Anlage 1 Definition |
| B.9 Toxizität nach 28-tägiger Gabe (dermal) |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Bezugssubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Vorbereitung |
| 1.6.2 Versuchsbedingungen |
| 1.6.2.1 Versuchstiere |
| 1.6.2.2 Anzahl und Geschlecht |
| 1.6.2.3 Dosierungen |
| 1.6.2.4 Limit-Test |
| 1.6.2.5 Beobachtungszeitraum |
| 1.6.3 Versuchsdurchführung |
| 1.6.4 Autopsie |
| 1.6.5 Histopathologische Untersuchungen |
| 2. Daten |
| 3. Abschlussbericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 3.2 Bewertung und Interpretation |
| 4. Literatur |
| B.10 In-vitro-Test auf Chromosomenaberrationen in Säugetierzellen |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen und Grenzen |
| Testprinzip |
| Beschreibung der Methode |
| Tabelle 1 Zur Beurteilung der Eignung des Labors und zur Wahl der Positivkontrollen empfohlene Referenzchemikalien |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literaturhinweise |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Formeln zur Bewertung der Zytotoxizität |
| B.11 Test auf Chromosomenaberrationen in Knochenmarkzellen von Säugetieren |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Überprüfung der Eignung des Labors |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Tabelle 1 Beispiele für Positivkontrollchemikalien |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literaturhinweise |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Faktorielles Modell zur Ermittlung geschlechtsspezifischer Differenzen beim In-vivo-Test auf Chromosomenaberrationen |
| B.12 Erythrozyten-Mikrokerntest bei Säugern |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Überprüfung der Eignung des Labors |
| Beschreibung der Methode |
| Tabelle 1 Beispiele für Positivkontrollchemikalien |
| Daten und Berichterstattung |
| Literaturhinweise |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Faktorieller Versuchsplan zur Ermittlung geschlechtsspezifischer Unterschiede beim In-vivo-Mikrokerntest |
| B.13./14. Mutagenität - Rückmutationstest unter Verwendung von Bakterien |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Ausgangsüberlegungen |
| 1.4 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.5 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.5.1 Vorbereitungen |
| 1.5.1.1 Bakterien |
| 1.5.1.2 Medium |
| 1.5.1.3 Stoffwechselaktivierung |
| 1.5.1.4 Prüfsubstanz/Zubereitung |
| 1.5.2 Prüfbedingungen |
| 1.5.2.1 Versuchsstämme (siehe 1.5.1.1) |
| 1.5.2.2 Expositionskonzentrationen |
| 1.5.2.3 Negativ- und Positivkontrollen |
| 1.5.3 Verfahren |
| 1.5.4 Inkubation |
| 2. Daten |
| 2.1 Aufbereitung der Ergebnisse |
| 2.2 Bewertung und Interpretation der Ergebnisse |
| 3. Abschlussbericht |
| 4. Literaturhinweise |
| B.15 (gestrichen) |
| B.16 (gestrichen) |
| B.17 In vitro-Genmutationsprüfung an Säugetierzellen anhand des HPRT- und des XPRT-Gens |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen und Begrenzungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Vorbereitungen |
| Medien und Kulturbedingungen |
| Vorbereitung der Kulturen |
| Stoffwechselaktivierung |
| Vorbereitung der Prüfchemikalie |
| Prüfbedingungen |
| Lösungsmittel |
| Messung der Zytotoxizität und Auswahl der Expositionskonzentrationen |
| Kontrollen |
| Tabelle 1: Zur Beurteilung der Eignung des Labors und zur Wahl der Positivkontrollen empfohlene Referenzstoffe |
| Verfahren |
| Behandlung mit der Prüfchemikalie |
| Expressionszeit des Phänotyps und Messung der Mutationshäufigkeit |
| Kompetenz des Labors |
| Historische Kontrolldaten |
| Daten und Berichterstattung |
| Darstellung der Prüfergebnisse |
| Akzeptanzkriterien |
| Beurteilung und Auswertung |
| Prüfbericht |
| Literatur |
| Anlage 1 - Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 - Formeln zur Bewertung der Zytotoxizität und der Mutantenhäufigkeit |
| B.18 (gestrichen) |
| B.19 (gestrichen) |
| B.20 (gestrichen) |
| B.21 In-vitro-Zelltransformationstest |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Bezugssubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 2. Daten |
| 3. Abschlussbericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 3.2 Interpretation |
| 4. Literatur |
| B.22 Dominantletal-Prüfung an Nagern |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Vorbereitungen |
| Prüfbedingungen |
| Tabelle 1 Beispiele für Positivkontrollstoffe |
| Verfahren |
| Anzahl der Versuchstiere |
| Verabreichungsdauer und Paarungsintervalle |
| Dosierungen |
| Verabreichung der Dosen |
| Beobachtungen |
| Gewebeentnahme und -verarbeitung |
| Daten und Berichterstattung |
| Auswertung der Ergebnisse |
| Akzeptanzkriterien |
| Bewertung und Auswertung der Ergebnisse |
| Prüfbericht |
| Literatur |
| Anlage 1 - Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 - Zeitlicher Ablauf der Spermatogenese bei Säugetieren |
| Abb. 1: Übersicht über die Dauer (in Tagen) der Entwicklung männlicher Keimzellen bei Mäusen und Ratten und beim Menschen. |
| Literatur |
| B.23 Spermatogonien-Prüfung auf Chromosomenaberrationen bei Säugetieren |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Überprüfung der Eignung des Labors |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Vorbereitungen |
| Prüfbedingungen - Lösungsmittel/Vehikel |
| Tabelle 1 Beispiele für Positivkontrollstoffe |
| Verfahren |
| Anzahl der Versuchstiere |
| Behandlungsplan |
| Dosierungen |
| Verabreichung der Dosen |
| Anmerkungen |
| Chromosomenpräparation |
| Analyse |
| Daten und Berichterstattung |
| Behandlung der Ergebnisse |
| Akzeptanzkriterien |
| Beurteilung und Auswertung |
| Prüfbericht |
| Literatur |
| Anlage 1 - Begriffsbestimmungen |
| B.24 (gestrichen) |
| B.25 In-vivo-Säuger-Translokationstest |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Bezugssubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 2. Daten |
| 3. Abschlussbericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 3.2 Interpretation |
| 4. Literatur |
| B.26 Prüfung auf subchronische orale Toxizität - 90-Tage-Toxizitätsstudie bei wiederholter oraler Verabreichung an Nagetieren |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Begriffsbestimmungen |
| 1.3 Prinzip der Methode |
| 1.4 Beschreibung der Methode |
| 1.4.1 Vorbereitung der Tiere |
| 1.4.2 Zubereitung der Dosen |
| 1.4.3 Prüfbedingungen |
| 1.4.3.1 Versuchstiere |
| 1.4.3.2 Zahl und Geschlecht der Versuchstiere |
| 1.4.3.3 Dosierung |
| 1.4.3.4 Limit-Test |
| 1.5 Versuchsdurchführung |
| 1.5.1 Verabreichung der Dosen |
| 1.5.2 Beobachtungen |
| 1.5.2.1 Körpergewicht und Futter-/Wasseraufnahme |
| 1.5.2.2 Hämatologische und klinischbiochemische Untersuchungen |
| 1.5.2.3 Autopsie |
| 1.5.2.4 Histopathologische Untersuchungen |
| 2. Daten und Berichterstattung |
| 2.1 Daten |
| 2.2 Prüfbericht |
| 2.2.1 Prüfsubstanz |
| 2.2.2 Versuchstierart |
| 2.2.3 Prüfbedingungen |
| 2.2.4 Ergebnisse |
| 3. Literatur |
| B.27 Prüfung auf subchronische orale Toxizität - 90-Tage-Toxizitätsstudie bei wiederholter oraler Verabreichung an Nicht-Nagetieren |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Begriffsbestimmungen |
| 1.3 Prinzip der Methode |
| 1.4 Beschreibung der Methode |
| 1.4.1 Auswahl von Versuchstierarten |
| 1.4.2 Vorbereitung der Tiere |
| 1.4.3 Zubereitung der Dosen |
| 1.5 Versuchsdurchführung |
| 1.5.1 Zahl und Geschlecht der Versuchstiere |
| 1.5.2 Dosierung |
| 1.5.3 Limit-Test |
| 1.5.4 Verabreichung der Dosen |
| 1.5.5 Beobachtungen |
| 1.5.5.1 Körpergewicht und Futter-/Wasseraufnahme |
| 1.5.5.2 Hämatologische und klinisch-biochemische Untersuchungen |
| 1.5.5.3 Autopsie |
| 1.5.5.4 Histopathologische Untersuchungen |
| 2. Daten und Berichterstattung |
| 2.1 Daten |
| 2.2 Prüfbericht |
| 2.2.1 Prüfsubstanz |
| 2.2.2 Versuchstierart |
| 2.2.3 Prüfbedingungen |
| 2.2.4 Ergebnisse |
| B.28 Prüfung auf subchronische Toxizität nach dermaler Applikation - 90-Tage-Test mit Nagern |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Bezugssubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 2. Daten |
| 3. Abschlussbericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 3.2 Interpretation |
| 4. Literatur |
| B.29 Prüfung auf sub-chronische Toxizität nach Inhalation - 90-Tage-Test |
| Zusammenfassung |
| Einleitung |
| Beschreibung der Methode |
| Toxizitätsstudien |
| Expositionsbedingungen |
| Überwachung der Expositionsbedingungen |
| Beobachtungen |
| Körpergewicht |
| Futter- und Wasseraufnahme |
| Klinische Pathologie |
| Tabelle 1: Klinische Standardpathologieparameter |
| Ophthalmologische Untersuchung |
| Makroskopische Pathologie und Organgewichte |
| Tabelle 2: Bei der Nekropsie aufbewahrte Organe und Gewebe |
| Histopathologie |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage 1 Definition |
| B.30 Prüfung auf chronische Toxizität |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Methode |
| Verfahren |
| Beobachtungen |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage 1 Definition |
| B.31 Studie zur Prüfung auf pränatale Entwicklungstoxizität |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Begriffsbestimmungen |
| 1.3 Referenzstoff |
| 1.4 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.5 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.5.1 Auswahl der Versuchstierarten |
| 1.5.2 Haltung und Fütterung |
| 1.5.3 Vorbereitung der Tiere |
| 1.6 Verfahren |
| 1.6.1 Anzahl und Geschlecht der Versuchstiere |
| 1.6.2 Zubereitung der Dosen |
| 1.6.3 Dosierung |
| 1.6.4 Limit-Test |
| 1.6.5 Verabreichung der Dosen |
| 1.6.6 Beobachtung der Muttertiere |
| 1.6.7 Körpergewicht und Futteraufnahme |
| 1.6.8 Autopsie |
| 1.6.9 Untersuchung des Uterusinhalts |
| 1.6.10 Untersuchung der Feten |
| 2. Daten |
| 2.1 Verarbeitung der Ergebnisse |
| 2.2 Bewertung der Ergebnisse |
| 2.3 Interpretation der Ergebnisse |
| 3. Berichterstattung |
| 3.1 Prüfbericht |
| 4. Literaturhinweise |
| B.32 Prüfung auf Kanzerogenität |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Methode |
| Verfahren |
| Beobachtungen |
| Pathologie |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage 1 Definition |
| B.33 Kombinierte Studien zur Prüfung auf chronische Toxizität und Kanzerogenität |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Methode |
| Verfahren |
| Beobachtungen (Chronische Toxizitätsphase) |
| Pathologie |
| Beobachtungen (Kanzerogenitätsphase) |
| Pathologie |
| Daten und Berichterstattung (Kanzerogenität und chronische Toxizität) |
| Literatur |
| Anlage 1 Definition |
| B.34 Prüfung auf Reproduktionstoxizität während einer Generation |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Bezugssubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 2. Daten |
| 3. Abschlussbericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 3.2 Interpretation |
| 4. Literatur |
| B.35 Zweigenerationenstudie zur Prüfung auf Reproduktionstoxizitat |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.3 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.3.1 Auswahl der Versuchstierarien |
| 1.3.2 Haltung und Fütterung |
| 1.3.3 Vorbereitung der Tiere |
| 1.4 Verfahren |
| 1.4.1 Anzahl und Geschlecht der Versuchstiere |
| 1.4.2 Zubereitung der Dosen |
| 1.4.3 Dosierung |
| 1.4.4 Limit-Test |
| 1.4.5 Verabreichung der Dosen |
| 1.4.6 Versuchsablauf |
| 1.4.7 Verpaarung |
| 1.4.7.1 Verpaarung der Elterngeneration (P) |
| 1.4.7.2 Verpaarung der F1-Generation |
| 1.4.7.3 Zweite Verpaarung |
| 1.4.7.4 Wurfgröße |
| 1.5 Beobachtungen |
| 1.5.1 Klinische Beobachtungen |
| 1.5.2 Körpergewicht und Futter-/Wasseraufnahme der Elterntiere |
| 1.5.3 Östruszyklus |
| 1.5.4 Spermienparameter |
| 1.5.5 Nachkommen |
| 1.5.6 Nekropsie |
| 1.5.7 Organgewichte |
| 1.5.8 Histopathologische Untersuchungen |
| 1.5.8.1 Elterntiere |
| 1.5.8.2 Entwöhnte Tiere |
| 2. Daten |
| 2.1 Verarbeitung der Ergebnisse |
| 2.2 Bewertung der Ergebnisse |
| 2.3 Interpretation der Ergebnisse |
| 3. Berichterstattung |
| 3.1 Prüfbericht |
| 4. Literaturhinweise |
| B.36 Toxikokinetik |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Grenzen |
| Definitionen |
| Tierschutzerwägungen |
| Beschreibung der Methoden |
| Zusätzliche Methoden |
| Daten und Berichterstattung |
| Alternative Expositionswege |
| Literatur |
| Anlage Definitionen |
| B.37 Verzögerte Neurotoxizität phosphororganischer Substanzen nach akuter Exposition |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.5 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.5.1 Vorbereitungen |
| 1.5.2 Prüfbedingungen |
| 1.5.2.1 Versuchstiere |
| 1.5.2.2 Anzahl und Geschlecht |
| 1.5.2.3 Dosierungen |
| 1.5.2.4 Limit-Test |
| 1.5.2.5 Beobachtungszeitraum |
| 1.5.3 Versuchsdurchführung |
| 1.5.3.1 Allgemeine Beobachtungen |
| 1.5.3.2 Körpergewicht |
| 1.5.3.3 Biochemische Untersuchungen |
| 1.5.3.4 Autopsie |
| 1.5.3.5 Histopathologische Untersuchung |
| 2. Daten |
| 3. Abschlussbericht |
| 3.3 Ergebnisse: |
| 4. Literatur |
| B.38 Verzögerte Neurotoxizität phosphororganischer Substanzen bei wiederholter Gabe über 28 Tage |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.4 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.4.1 Vorbereitungen |
| 1.4.2 Prüfbedingungen |
| 1.4.2.1 Versuchstiere |
| 1.4.2.2 Anzahl und Geschlecht |
| 1.4.2.3 Dosierungen |
| 1.4.2.4 Limit-Test |
| 1.4.2.5 Beobachtungszeitraum |
| 1.4.3 Versuchsdurchführung |
| 1.4.3.1 Allgemeine Beobachtungen |
| 1.4.3.2 Körpergewicht |
| 1.4.3.3 Biochemische Untersuchungen |
| 1.4.3.4 Autopsie |
| 1.4.3.5 Histopathologische Untersuchung |
| 2. Daten |
| 3. Abschlussbericht |
| 4. Literatur |
| B.39 In-vivo-Test zur unplanmäßigen DNA-Synthese (UDS) in Säugetierleberzellen |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.4 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.4.1 Vorbereitungen |
| 1.4.1.1 Versuchstiere |
| 1.4.1.2 Haltungs- und Fütterungsbedingungen |
| 1.4.1.3 Vorbereitung der Tiere |
| 1.4.1.4 Prüfsubstanz/Vorbereitung |
| 1.4.2 Prüfbedingungen |
| 1.4.2.1 Lösungsmittel/Vehikel |
| 1.4.2.2 Kontrollen |
| 1.5 Verfahren |
| 1.5.1 Anzahl und Geschlecht der Tiere |
| 1.5.2 Behandlungsplan |
| 1.5.3 Dosierungen |
| 1.5.4 Limit-Test |
| 1.5.5 Verabreichung |
| 1.5.6 Präparation der Leberzellen |
| 1.5.7 Bestimmung der UDS |
| 1.5.8 Analyse |
| 2. Daten |
| 2.1 Aufbereitung der Ergebnisse |
| 2.2 Bewertung und Interpretation der Ergebnisse |
| 3. Abschlussbericht |
| 4. Literaturhinweise |
| B.40 In vitro-Hautverätzung: TER-Prüfmethode |
| Einleitung |
| Begriffsbestimmungen |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Nachweis der Leistungfähigkeit |
| Tabelle 1 Liste der Leistungsstoffe |
| Verfahren |
| Versuchstiere |
| Gewinnung der Hautstücke |
| Applikation der Prüfchemikalie und Kontrollstoffe |
| TER-Messungen |
| Farbbindungsmethoden |
| Anwendung und Entfernung von Sulforhodamin-B-Farbstoff |
| Berechnung des Farbgehalts |
| Akzeptanzkriterien |
| Auswertung der Ergebnisse |
| Daten und Berichterstattung |
| Daten |
| Prüfbericht |
| Literatur |
| Abbildung 1 Apparatur Für Die Ter-Prüfung Mit Rattenhaut |
| Abbildung 2 Abmessungen Der Polytetrafluorethylen- (PTFE-) und Rezeptorrohre und Der Verwendeten Elektroden |
| Anlage - Begriffsbestimmungen |
| B.40.bis Invitro-Prüfung auf hautätzende Wirkung: Prüfmethode mit rekonstruierter humaner Epidermis (RHE) |
| Einleitung |
| Begriffsbestimmungen |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Nachweis der Leistungfähigkeit |
| Tabelle 1 Liste der Leistungsstoffe |
| Verfahren |
| Elemente der RHE-Prüfmethode |
| Allgemeine Bedingungen |
| Funktionale Bedingungen |
| Tabelle 2 Akzeptanzspannen für OD-Werte der Negativkontrolle zur Kontrolle der Chargenqualität |
| Tabelle 3 Chargenfreigabekriterien im Rahmen der Qualitätskontrolle |
| Applikation der Prüf- und Kontrollchemikalien |
| Zellviabilitätsmessungen |
| Akzeptanzkriterien |
| Auswertung der Ergebnisse und Prädiktionsmodell |
| Tabelle 4 Vorhersagemodell EpiSkinTM |
| Tabelle 5 EpiDermTM SCT, SkinEthicTM RHE und epiCS® |
| Daten und Berichterstattung |
| Daten |
| Prüfbericht |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 - Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 - Hauptelemente der für die Prüfung von Hautverätzungen validierten RHE-Prüfmodelle |
| Anlage 3 - Leistung der Prüfmodelle zur Unterkategorisierung |
| Anlage 4 - Schlüsselparameter und Akzeptanzkriterien für die Qualifizierung eines HPLC/UPLC-Spektrophotometriesystems zur Messung von aus RhE-Gewebe extrahiertem MTT-Formazan |
| B.41 In-vitro-3T3-NRU-Fototoxizitätstest |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Prinzip der Testmethode |
| 1.4 Beschreibung der Testmethode |
| 1.4.1 Zubereitungen |
| 1.4.1.1 Zellen |
| 1.4.1.2 Medien und Kulturbedingungen |
| 1.4.1.3 Ansetzen der Kulturen |
| 1.4.1.4 Zubereitung der Testsubstanzen |
| 1.4.1.5 Bestrahlungsbedingungen |
| 1.4.1.5.1 Lichtquelle |
| 1.4.1.5.2 Dosimetrie |
| 1.4.2 Testbedingungen |
| 1.4.2.1 Konzentrationen der Testsubstanz |
| 1.4.2.2 Kontrollen |
| 1.4.2.2.1 Strahlungsempfindlichkeit der Zellen, Ermittlung historischer Daten |
| 1.4.2.2.2 Strahlungsempfindlichkeit, Kontrolle des laufenden Tests |
| 1.4.2.2.3 Viabilität der Lösemittelkontrollen |
| 1.4.2.2.4 Positivkontrolle |
| 1.4.3 Testverfahren |
| 1.4.3.1 l. Tag |
| 1.4.3.2 2. Tag |
| 1.4.3.3 3. Tag |
| 1.4.3.3.1 Mikroskopische Evaluierung |
| 1.4.3.3.2 Neutralrot-Aufnahme-Test |
| 2. Daten |
| 2.1 Qualität und Quantität der Daten |
| 2.2 Ergebnisbewertung |
| 2.3 Interpretation der Ergebnisse |
| Tabelle 1 |
| 2.4 Interpretation der Daten |
| 3. Berichterstattung |
| 4. Literaturhinweise |
| Anlage 1 Rolle des 3T3 NRU-PT in einer sequenziellen Prüfstrategie für Fototoxizitätstests von Chemikalien |
| Anlage 2 |
| Abbildung 1 Spektrale Leistungsverteilung eines gefilterten Solarsimulators |
| Abbildung 2 Bestrahlungsempfindlichkeit von Balb/c-3T3-Zellen (im UVA-Bereich gemessen) |
| B.42 Hautsensibilisierung: Lokaler Lymphknotentest |
| Einleitung |
| Begriffsbestimmungen |
| Ausgangsüberlegungen und Begrenzungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Testverfahren |
| Tabelle 1: Erythem-Klassifizierung |
| Beobachtungen |
| Berechnung der Ergebnisse |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage 1 |
| Einleitung |
| I. Wesentliche Elemente der Prüfmethode |
| II. Mindestliste der Referenzsubstanzen |
| Tabelle 1 Empfohlene chemische Rreferenzsubstanzen für die Leistungsstandards des LLNA |
| III. Vorgegebene Zuverlässigkeits- und Genauigkeitsstandards |
| Anlage 2 Begriffsbestimmungen |
| B.43 Prüfung auf Neurotoxizität bei Nagetieren |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Begriffsbestimmungen |
| 1.3 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.4 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.4.1 Auswahl der Tierspezies |
| 1.4.2 Haltung und Fütterung |
| 1.4.3 Vorbereitung der Versuchstiere |
| 1.4.4 Verabreichungsweg und Vorbereitung der Testsubstanz |
| 1.5 Versuchsdurchführung |
| 1.5.1 Anzahl und Geschlecht der Tiere |
| 1.5.2 Behandlungs- und Kontrollgruppe |
| 1.5.3 Überprüfung der Zuverlässigkeit |
| 1.5.4 Wahl der Dosierungen |
| 1.5.5 Limit-Test |
| 1.5.6 Verabreichung der Dosen |
| 1.6 Beobachtungen |
| 1.6.1 Häufigkeit der Beobachtungen und Untersuchungen |
| 1.6.1.1 Beobachtungen zum allgemeinen Gesundheitszustand und zur Mortalität/Morbidität |
| 1.6.1.2 Detaillierte klinische Beobachtungen |
| 1.6.1.3 Funktionstests |
| 1.6.2 Körpergewicht und Futter-/Trinkwasserverbrauch |
| 1.6.3 Ophthalmologie |
| 1.6.4 Hämatologie und klinische Biochemie |
| 1.6.5 Histopathologie |
| 2. Daten |
| 2.1 Behandlung der Ergebnisse |
| 2.2 Auswertung und Interpretation der Ergebnisse |
| 3. Bericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 4. Literatur |
| Tabelle 1: Benötigte Mindestanzahl der Tiere pro Gruppe, abhängig davon, ob die Prüfung auf Neurotoxizität als Einzelstudie oder in Verbindung mit anderen Studien durchgeführt wird |
| Tabelle 2: Häufigkeit der klinischen Beobachtungen und Funktionstests |
| B.44 Hautresorption: In-vivo-Methode |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.4 Beschreibung der Testmethode |
| 1.4.1 Auswahl von Versuchstierarten |
| 1.4.2 Zahl und Geschlecht der Versuchstiere |
| 1.4.3 Unterbringungs- und Fütterungsbedingungen |
| 1.4.4 Präparation der Tiere |
| 1.4.5 Testsubstanz |
| 1.4.6 Testpräparation |
| 1.4.7 Aufbringen auf die Haut |
| 1.4.8 Dauer der Exposition und Probenahme |
| 1.4.9 Abschließende Schritte |
| 1.4.10 Analyse |
| 2. Daten |
| 3. Berichterstattung |
| 3.1 Abschlussbericht |
| 4. Literaturhinweise |
| Abbildung 1 Beispiel für die Gestaltung einer typischen Vorrichtung zur Begrenzung und zum Schutz der dermalen Applikationsstelle bei In-vivo-Studien zur perkutanen Resorption |
| B.45 Hautresorption: In-vitro-Methode |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.4 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.4.1 Diffusionszelle |
| 1.4.2 Rezeptorflüssigkeit |
| 1.4.3 Herstellung der Hautstücke |
| 1.4.4 Intakte Beschaffenheit des hergestellten Hautstücks |
| 1.4.5 Testsubstanz |
| 1.4.6 Testpräparation |
| 1.4.7 Konzentrationen und Formulierungen von Testsubstanzen |
| 1.4.8 Aufbringen auf die Haut |
| 1.4.9 Temperatur |
| 1.4.10 Dauer der Exposition und Probenahme |
| 1.4.11 Abschließende Schritte |
| 1.4.12 Analyse |
| 2. Daten |
| 3. Berichterstattung |
| 3.1 Abschlussbericht |
| 4. Literaturhinweise |
| Abbildung 1 Beispiel für den typischen Aufbau einer statischen Diffusionszelle für perkutane In-vitro-Resorptionsstudien |
| B.46 In vitro-Hautreizung: Prüfmethode Mit rekonstruierter humaner Epidermis |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen und Begrenzungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Nachweis der Leistungsfähigkeit |
| Tabelle 1 Leistungsstoffe |
| Verfahren |
| Elemente der RHE-Prüfmethode |
| Allgemeine Bedingungen |
| Funktionale Bedingungen |
| Tabelle 2 Akzeptanzbereiche für OD-Werte der Negativkontrolle der Prüfmodelle dieser Prüfmethode |
| Tabelle 3 Beispiele für Chargenfreigabekriterien der Prüfmodelle dieser Prüfmethode im Rahmen der Qualitätskontrolle |
| Applikation der Prüf- und Kontrollchemikalien |
| Zellviabilitätsmessungen |
| Akzeptanzkriterien |
| Auswertung der Ergebnisse und Prädiktionsmodell |
| Daten und Berichterstattung |
| Daten |
| Prüfbericht |
| Prüfverfahren: |
| Akzeptanzkriterien für Prüfläufe und Prüfungen: |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 - Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 - Prüfmodelle dieser Prüfmethode |
| Anlage 3 - Spezifische Protokollparameter der einzelnen Prüfmodelle dieser Prüfmethode |
| Anlage 4 - Schlüsselparameter und Akzeptanzkriterien für die Qualifizierung eines HPLC/UPLC-Spektrophotometriesystems zur Messung von aus RHE-Geweben extrahiertem MTT-Formazan |
| B.47 Trübungs- und Durchlässigkeitstest an der Rinderhornhaut zwecks Identifizierung von i) Chemikalien, die schwere Augenschäden verursachen, und ii) Chemikalien, die keine Einstufung als augenreizend oder schwer augenschädigend erfordern |
| Einleitung |
| Vorbemerkungen und Einsatzgrenzen |
| Testprinzip |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literaturhinweise |
| Anlagen |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Vorhersagefähigkeit der BCOP-Prüfmethode |
| Tabelle 1 Vorhersagefähigkeit der BCOP-Prüfmethode für die Ermittlung von Chemikalien, die schwere Augenschäden verursachen |
| Tabelle 2 Vorhersagefähigkeit der BCOP-Prüfmethode für die Ermittlung von Chemikalien, die keine Einstufung als augenreizend oder schwer augenschädigend erfordern ("Stoffe ohne Reizwirkung") |
| Anlage 3 Leistungschemikalien für die BCOP-Prüfmethode |
| Tabelle 1 Empfohlene Chemikalien für den Nachweis der technischen Kompetenz von Laboratorien zur Durchführung des BCOP-Tests |
| Anlage 4 BCOP-Hornhauthalter |
| Anlage 5 Opazimeter |
| B.48 Test am isolierten Hühnerauge zur Identifizierung von i) Chemikalien, die schwere Augenschäden verursachen, und ii) Chemikalien, die keine Einstufung als augenreizend oder schwer augenschädigend erfordern |
| Einleitung |
| Vorbemerkungen und Einsatzgrenzen |
| Testprinzip |
| Verfahren |
| Tabelle 1 Hornhauttrübungswerte |
| Tabelle 2 Fluorescein-Verfärbungswerte |
| Daten und Berichterstattung |
| Tabelle 3 Kriterien für die Einstufung in ICE-Klassen - Hornhautschwellung |
| Tabelle 4 Kriterien für die Einstufung in ICE-Klassen - Hornhauttrübung |
| Tabelle 5 Kriterien für die Einstufung in ICE-Klassen - mittlere Fluorescein-Verfärbung |
| Tabelle 6In-vitro-Gesamtklassifizierung |
| Literaturhinweise |
| Anlagen |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Leistungschemikalien für den ICE |
| Tabelle 1 Empfohlene Chemikalien für den Nachweis der technischen Kompetenz von Laboratorien zur Durchführung des ICE-Tests |
| Anlage 3 Schaubilder des ICE-Superfusionsgeräts und der ICE-Augenklemmen |
| B.49 In-vitro-Mikronukleustest an Säugetierzellen |
| Einleitung |
| Vorbemerkungen und Einsatzgrenzen |
| Testprinzip |
| Beschreibung der Methode |
| Tabelle 1 Zur Beurteilung der Eignung des Labors und zur Wahl der Positivkontrollen empfohlene Referenzchemikalien |
| Verfahren |
| Tabelle 2 Zellbehandlung und Entnahmezeitpunkte beim MNvit-Test |
| Daten und Berichterstattung |
| Literaturhinweise |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Formeln zur Bewertung der Zytotoxizität |
| B.50 Hautsensibilisierung: Lokaler Lymphknotentest: DA |
| Einleitung |
| Begriffsbestimmungen |
| Ausgangsüberlegungen und Begrenzungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Testverfahren |
| Beobachtungen |
| Berechnung der Ergebnisse |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| B.51 Hautsensibilisierung: Lokaler Lymphknotentest: BRDU-ELISA |
| Einleitung |
| Begriffsbestimmungen |
| Ausgangsüberlegungen und Begrenzungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Testverfahren |
| Beobachtungen |
| Berechnung der Ergebnisse |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| B.52 Akute Inhalationstoxizität - Akut-toxische Klassenmethode |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Methode |
| Expositionsbedingungen |
| Überwachung der Expositionsbedingungen |
| Verfahren |
| Beobachtungen |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Definition |
| Anlage 2 Verfahrensweise für jede Startkonzentration von Gasen (ppm/4 Std.) |
| Anlage 2a Akute Inhalationstoxizität: Prüfverfahren mit einer Ausgangskonzentration von 100 ppm/4 Std. für Gase |
| Anlage 2b Akute Inhalationstoxizität: Prüfverfahren mit einer Ausgangskonzentration von 500 ppm/4 Std. für Gase |
| Anlage 2c Akute Inhalationstoxizität: Prüfverfahren mit einer Ausgangskonzentration von 2.500 ppm/4 Std. für Gase |
| Anlage 2d Akute Inhalationstoxizität: Prüfverfahren mit einer Ausgangskonzentration von 20.000 ppm/4 Std. für Gase |
| Anlage 3 Verfahrensweise für jede Startkonzentration von Dämpfen (mg/l/4 Std.) |
| Anlage 3a Akute Inhalationstoxizität: Prüfverfahren mit einer Ausgangskonzentration von 0,5 mg/l/4 Std. für Dämpfe |
| Anhang 3b Akute Inhalationstoxizität: Prüfverfahren mit einer Ausgangskonzentration von 2 mg/l/4 Std. für Dämpfe |
| Anlage 3c Akute Inhalationstoxizität: Prüfverfahren mit einer Ausgangskonzentration von 10 mg/l/4 Std. für Dämpfe |
| Anlage 3d Akute Inhalationstoxizität: Prüfverfahren mit einer Ausgangskonzentration von 20 mg/l/4 Std. für Dämpfe |
| Anlage 4 Verfahrensweise für jede Startkonzentration von Aerosolen (mg/l/4 Std.) |
| Anlage 4a Akute Inhalationstoxizität: Prüfverfahren mit einer Ausgangskonzentration von 0.05 mg/l/4 Std. für Dämpfe |
| Anlage 4b Akute Inhalationstoxizität: Prüfverfahren mit einer Ausgangskonzentration von 0,5 mg/l/4Std. für Aerosole |
| Anlage 4c Akute Inhalationstoxizität: Prüfverfahren mit einer Ausgangskonzentration von 1 mg/l/4 Std. für Aerosole |
| Anlage 4d Akute Inhalationstoxizität: Prüfverfahren mit einer Ausgangskonzentration von 5 mg/l/4 Std. für Aerosole |
| B.53. Prüfung auf Entwicklungsneurotoxizität |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Vorbereitungen für die Prüfung |
| Verfahren |
| Beobachtungen |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage 1 Beispiele |
| Anlage 2 Begriffsbestimmungen |
| B.54 Uterotropher Bioassay mit Nagern: Ein Kurzzeit-Screening-Test auf östrogene Eigenschaften |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen und Begrenzungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Methode |
| Auswahl der Versuchstierarten |
| Haltungs- und Fütterungsbedingungen |
| Vorbereitung der Tiere |
| Verfahren |
| Eignungsprüfung des Prüflabors |
| Zahl und Zustand der Versuchstiere |
| Alter der unreifen Tiere |
| Ovarektomieverfahren |
| Körpergewicht |
| Dosierung |
| Ausführungen zur Dosisfindung |
| Verabreichung der Dosen |
| Beobachtungen |
| Daten und Berichterstattung |
| Leitfaden für die Interpretation und Akzeptanz der Ergebnisse |
| Abbildung 1 Schematische Darstellung der operativen Entfernung der Ovarien |
| Abbildung 2 Entfernung und Vorbereitung der Uterusgewebe für die Gewichtsbestimmung |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Rahmenkonzept der OECD für die Testung und Bewertung endokriner Disruptoren |
| Anmerkungen zum Rahmenkonzept |
| Literatur |
| B.55 Hershberger-Bioassay mit Ratten: Ein Kurzzeit-Screening-Test auf (Anti-)androgene Eigenschaften |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Methode |
| Verfahren |
| Beobachtungen |
| Berichterstattung |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Rahmenkonzept der OECD für die Testung und Bewertung endokriner Disruptoren |
| Anmerkungen zum Rahmenkonzept |
| Literatur |
| B.56 Erweiterte Ein-Generationen-Prüfung auf Reproduktionstoxizität |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen und Ziele |
| Beschreibung der Prüfmethode/Vorbereitungen für den Test |
| Verfahren |
| Beobachtungen am lebenden Tier |
| Abschliessende Beobachtungen |
| Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage 1 Maßnahmen und Beobachtungen im Rahmen der FOB (Functional Observational Battery) (Kohorte 2A) |
| Anlage 2 Begriffsbestimmungen |
| B.57 H295R-Steroidgenese-Assay |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen und Grenzen |
| Kulturtechnik |
| Anforderungen an die Qualitätskontrolle |
| Verfahren der Chemikalienexposition |
| Datenanalyse und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage Begriffsbestimmungen |
| B.58 Genmutations-Assays an somatischen Zellen und Keimzellen transgener Nagetiere |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Beschreibung der Methode |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage Begriffsbestimmungen |
| B.59In-chemico-Hautsensibilisierung: Direkt-Peptidreaktivitätstest (DPRA) |
| Einleitung |
| Vorbemerkungen, Anwendbarkeit und Einsatzgrenzen |
| Testprinzip |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Tabelle 1 Vorhersagemodell Cystein 1:10/Lysin 1:50 |
| Tabelle 2 Vorhersagemodell Cystein 1:10 |
| Literaturhinweise |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Leistungsstoffe |
| Tabelle 1 Empfohlene Leistungsstoffe für den Nachweis der technischen Kompetenz zur Durchführung des Direkt-Peptidreaktivitätstests |
| Anlage 3 Beispiele für die Analysesequenz |
| B.60In-vitro-Hautsensibilisierung: ARE-Nrf2 Luciferase-Prüfmethode |
| Einleitung |
| Vorbemerkungen, Anwendbarkeit und Einsatzgrenzen |
| Testprinzip |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Abbildung 1 Vorhersagemodell des KeratinoSensTM-Tests. Eine KeratinoSensTM-Vorhersage sollte im Rahmen eines IATa sowie gemäß den Nummern 9 und 11 in Betracht gezogen werden |
| Literaturhinweise |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Leistungsstoffe |
| Tabelle 1 Empfohlene Stoffe zum Nachweis der technischen Leistungsfähigkeit beim KeratinoSensTM-Test |
| Anlage 3 Qualitätskontrolle bei Lumineszenzmessungen |
| B.61 Fluorescein-Leckage-Prüfmethode zur Identifizierung von Stoffen mit augenverätzender und stark augenreizender Wirkung |
| Einleitung |
| Vorbemerkungen und Einsatzgrenzen |
| Testprinzip |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literaturhinweise |
| Anlage 1 Diagramm von MDCK-Zellen, die auf einer Insertmembran für die FL-Prüfmethode kultiviert wurden |
| Anlage 2 Definitionen |
| Anlage 3 Leistungschemikalien für die FL-Prüfmethode |
| Tabelle 1 Empfohlene Chemikalien für den Nachweis der technischen Kompetenz von Laboratorien zur Durchführung des FL-Tests |
| B.62 Alkalischer In-vivo-Comet-Assay an Säugetierzellen |
| Einleitung |
| Vorbemerkungen und Einsatzgrenzen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Überprüfung der Eignung des Labors |
| Beschreibung der Methode |
| Tabelle 1 Beispiele für Positivkontrollstoffe und einige der jeweils zutreffenden Zielgewebe |
| Verfahren |
| Behandlungsplan |
| Vorbereitung der Objektträger |
| Daten und Berichterstattung |
| Literaturhinweise |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Faktorieller Versuchsplan zur Ermittlung geschlechtsspezifischer Unterschiede beim In-vivo-Comet-Assay |
| Anlage 3 Gegenwärtige Einsatzgrenzen des Tests |
| B.63 Screening-Prüfung zur Bewertung der Reproduktions-/Entwicklungstoxizität |
| B.64 Kombinierte Screening-Prüfung mit wiederholter Verabreichung zur Bewertung der Reproduktions-/Entwicklungstoxizität |
| B.65 In-vitro-Prüfmethode zur Untersuchung der MembraN-Barriere auf Hautverätzungen |
| B.66 STTA-in-vitro-Assays zum Nachweis von Östrogenrezeptor-Agonisten und -Antagonisten |
| B.67 In-vitro-Genmutationsprüfung an Säugetierzellen anhand des Thymidinkinase-Gens |
| B.68 In-vitro-Prüfmethode mit Kurzzeitexposition zur Ermittlung von i) Chemikalien, die schwere Augenschäden verursachen, und ii) Chemikalien, die keine Einstufung als augenreizend oder schwer augenschädigend erfordern |
| B.69 Prüfmethode unter Verwendung von rekonstruiertem menschlichem hornhautartigem Epithel (RhCE) zur Ermittlung von Chemikalien, bei denen eine Einstufung und Kennzeichnung als augenreizend oder schwer augenschädigend nicht erforderlich ist |
| B.70 In-vitro-Assays mit einem humanen rekombinanten Östrogenrezeptor (hrER) zur Ermittlung von Chemikalien mit ER-Bindungsaffinität |
| B.71 In-vitro-Tests zur Sensibilisierung der Haut in Bezug auf den Schlüsselvorgang der Aktivierung von dendritischen Zellen auf dem Adverse Outcome Pathway (AOP) für die Sensibilisierung der Haut |
| Teil C Ökotoxizität |
| C.1 Akute Toxizität für Fische |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Reagenzien |
| 1.6.1.1 Lösungen der Prüfsubstanzen |
| 1.6.1.2 Hälterungs- und Verdünnungswasser |
| 1.6.2 Geräte |
| 1.6.3 Prüforganismen |
| 1.6.3.1 Hälterung |
| 1.6.3.2 Mortalität |
| 1.6.4 Anpassung |
| 1.6.5 Durchführung der Prüfung |
| 2. Daten und Auswertung |
| 3. Abschlussbericht |
| 4. Literatur |
| Anlage 1 Zubereitetes Wasser |
| Anlage 2 Für die Prüfung empfohlene Fischarten |
| Anlage 3 Beispiel für eine Konzentrations-Mortalitätskurve |
| C.2 Daphnia-Sp.-Test auf akute Schwimmunfähigkeit |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Prinzip der Testmethode |
| 1.4 Informationen zur Testsubstanz |
| 1.5 Referenzsubstanzen |
| 1.6 Qualitätskriterien |
| 1.7 Beschreibung der Testmethode |
| 1.7.1 Geräte |
| 1.7.2 Testorganismen |
| 1.7.3 Halte- und Verdünnungswasser |
| 1.7.4 Testlösungen |
| 1.8 Durchführung des Tests |
| 1.8.1 Expositionsbedingungen |
| 1.8.1.1 Testgruppen und Kontrollen |
| 1.8.1.2 Testkonzentrationen |
| 1.8.1.3 Inkubationsbedingungen |
| 1.8.1.4 Testdauer |
| 1.8.2 Beobachtungen |
| 1.8.3 Analysemessungen |
| 1.9 Limit-Test |
| 2. Daten |
| 3. Berichterstattung |
| 3.1 Testbericht |
| 4. Literaturhinweise |
| Anlage 1 Chemische Eigenschaften einer geeigneten Zusammensetzung von Verdünnungswasser |
| Anlage 2 Beispiele für geeignetes zubereitetes Testwasser |
| C.3 Süsswasseralgen und Cyanobakterien: Wachstumsinhibitionstest |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Informationen zur Prüfchemikalie |
| Validität des Tests |
| Referenzchemikalien |
| Anwendbarkeit des Tests |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Daten und Berichterstattung |
| Prüfbericht |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Stämme, die sich für den Test als geeignet erwiesen haben |
| Anlage 3 Nährmedien |
| Anlage 4 Beispiel eines Verfahrens zur Kultivierung der Algen |
| Anlage 5 Datenanalyse durch nichtlineare Regression |
| Literatur |
| C.4 Biologische Abbaubarkeit - Bestimmung der "leichten" biologischen Abbaubarkeit |
| Teil I Allgemeines |
| I.1 Einleitung |
| I.2 Auswahl des geeigneten Verfahrens |
| Tabelle 1: Anwendbarkeit der Prüfverfahren |
| I.3 Referenzsubstanzen |
| I.4 Prinzip der Methode |
| I.5 Qualitätskriterien |
| I.5.1 Reproduzierbarkeit |
| I.5.2 Gültigkeit des Versuchs |
| I.6 Allgemeine Verfahren und Vorbereitungen |
| Tabelle 2: Prüfbedingungen |
| I.6.1 Verdünnungswasser |
| I.6.2 Stammlösungen von mineralischen Bestandteilen |
| I.6.3 Stammlösungen der Chemikalien |
| I.6.4 Inokula |
| I.6.4.1 Inokulum aus Belebtschlamm |
| I.6.4.2 Andere Quellen für das Inokulum |
| I.6.5 Vorbereitung der Inokula |
| I.6.6 Abiotische Kontrollen |
| I.6.7 Anzahl der Flaschen |
| I.7 Daten und Auswertung |
| I.7.1 Messung des Abbaus mittels DOC-Bestimmung |
| I.7.2 Messung des Abbaus mittels spezifischer Analytik |
| I.7.3 Abiotischer Abbau |
| I.8 Abschlussbericht |
| Teil II DOC-Dieaway-Test - Abnahme von gelöstem organischem Kohlenstoff (DOC) (Methode C.4-A) |
| II.1 Prinzip der Methode |
| II.2 Beschreibung der Methode |
| II.2.1 Geräte |
| II.2.2 Ansatz des mineralischen Mediums |
| II.2.3 Ansatz und Vorbereitung des Inokulums |
| II.2.4 Ansatz der Flaschen |
| II.2.5 Anzahl der Flaschen in einem typischen Durchgang |
| II.2.6 Durchführung der Prüfung |
| II.3 Daten und Abschlussbericht |
| II.3.1 Auswertung der Ergebnisse |
| II.3.2 Gültigkeit der Ergebnisse |
| II.3.3 Abschlussbericht |
| II.4 Datenblatt |
| Teil III Modifizierter OECD-Screening-Test (Methode C.4-B) |
| III.1 Prinzip der Methode |
| III.2 Beschreibung der Methode |
| III.2.1 Geräte |
| III.2.2 Ansatz des mineralischen Mediums |
| III.2.3 Ansatz und Vorbereitung des Inokulums |
| III.2.4 Ansatz der Flaschen |
| III.2.5 Anzahl der Flaschen in einem typischen Durchgang |
| III.2.6 Durchführung der Prüfung |
| III.3 Daten und Abschlussbericht |
| III.3.1 Auswertung der Ergebnisse |
| III.3.2 Gültigkeit der Ergebnisse |
| III.3.3 Prüfbericht |
| III.4 Datenblatt |
| Teil IV CO2-Entwicklungstest (Methode C.4-C) |
| IV.1 Prinzip der Methode |
| IV.2 Beschreibung der Methode |
| IV.2.1 Geräte |
| IV.2.2 Ansatz des mineralischen Mediums |
| IV.2.3 Ansatz und Vorbereitung des Inokulums |
| IV.2.4 Ansatz der Flaschen |
| IV.2.5 Anzahl der Flaschen in einem typischen Durchgang |
| IV.2.6 Durchführung der Prüfung |
| IV.3 Daten und Abschlussbericht |
| IV.3.1 Auswertung der Ergebnisse |
| IV.3.2 Validität der Ergebnisse |
| IV.3.3 Abschlussbericht |
| IV.4 Datenblatt |
| Teil V Manometrischer Respirationstest (Methode C.4-D) |
| V.1 Prinzip der Methode |
| V.2 Beschreibung der Methode |
| V.2.1 Geräte |
| V.2.2 Ansatz des mineralischen Mediums |
| V.2.3 Ansatz und Vorbereitung des Inokulums |
| V.2.4 Ansatz der Flaschen |
| V.2.5 Anzahl der Flaschen in einem typischen Durchgang |
| V.2.6 Durchführung der Prüfung |
| V.3 Daten und Abschlussbericht |
| V.3.1 Auswertung der Ergebnisse |
| V.3.2 Gültigkeit der Ergebnisse |
| V.3.3 Abschlussbericht |
| V.4 Datenblatt |
| Teil VI Geschlossener Flaschentest (Methode C.4-E) |
| VI.1 Prinzip der Methode |
| VI.2 Beschreibung der Methode |
| VI.2.1 Geräte |
| VI.2.2 Ansatz des mineralischen Mediums |
| VI.2.3 Ansatz des Inokulums |
| VI.2.4 Ansatz der Flaschen |
| VI.2.5 Anzahl der Flaschen in einem typischen Ansatz |
| VI.2.6 Durchführung der Prüfung |
| VI.3 Daten und Abschlussbericht |
| VI.3.1 Auswertung der Ergebnisse |
| VI.3.2 Gültigkeit der Ergebnisse |
| VI.3.3 Abschlussbericht |
| VI.4 Datenblatt |
| Teil VII MITI-Test (Methode C.4-F) |
| VII.1 Prinzip der Methode |
| VII.2 Beschreibung der Methode |
| VII.2.1 Geräte |
| VII.2.2 Ansatz des mineralischen Mediums |
| VII.2.3 Ansatz des Inokulums |
| VII.2.4 Ansatz der Flaschen |
| VII.2.5 Durchführung der Prüfung |
| VII.3 Daten und Abschlussbericht |
| VII.3.1 Auswertung der Ergebnisse |
| VII.3.2 Gültigkeit der Ergebnisse |
| VII.3.3 Abschlussbericht |
| VII.4 Datenblatt |
| Anlagen |
| Anlage 1 Abkürzungen und Definitionen |
| Anlage 2 Berechnung und Bestimmung geeigneter Summenparameter |
| 1. Kohlenstoffgehalt |
| 2. Theoretischer Sauerstoffbedarf (ThSB) |
| 3. Chemischer Sauerstoffbedarf (CSB) |
| 4. Gelöster organischer Kohlenstoff (DOC) |
| Anlage 3 Bewertung der biologischen Abbaubarkeit von schwerlöslichen Substanzen |
| Anlage 4 Beurteilung der biologischen Abbaubarkeit von chemischen Substanzen, bei denen Verdacht auf Toxizität gegenüber dem Inokulum besteht |
| Anlage 5 Berücksichtigung der Sauerstoffaufnahme infolge Nitrifikation |
| C.5 Abbaubarkeit - Biochemischer Sauerstoffbedarf |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 2. Daten und Auswertung |
| 3. Abschlussbericht |
| 4. Literatur |
| C.6 Abbaubarkeit - Chemischer Sauerstoffbedarf |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 2. Daten und Auswertung |
| 3. Abschlussbericht |
| 4. Literatur |
| C.7 Abbaubarkeit - Abiotischer Abbau: Hydrolyse in Abhängigkeit vom pH-Wert |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Anwendungsbereich der Testmethode |
| 1.4 Prinzip der Testmethode |
| 1.5 Informationen zur Testsubstanz |
| 1.6 Referenzsubstanzen |
| 1.7 Qualitätskriterien |
| 1.7.1 Wiederfindungsrate |
| 1.7.2 Wiederholbarkeit und Empfindlichkeit der Analysemethoden |
| 1.7.3 Konfidenzintervalle für Kinetikdaten der Hydrolyse |
| 1.8 Beschreibung der Testmethode |
| 1.8.1 Geräte und Apparatur |
| 1.8.2 Applikation der Testsubstanz |
| 1.8.3 Pufferlösungen |
| 1.8.4 Testbedingungen |
| 1.8.4.1 Testtemperatur |
| 1.8.4.2 Licht und Sauerstoff |
| 1.8.4.3 Testdauer |
| 1.8.5 Durchführung des Tests |
| 1.8.5.1 Vortest (Stufe 1) |
| 1.8.5.2 Hydrolyse instabiler Substanzen (Stufe 2) |
| 1.8.5.3 Feststellung der Hydrolyseprodukte (Stufe 3) |
| 1.8.5.4 Zusätzliche Tests |
| 2. Daten |
| 2.1 Aufbereitung der Ergebnisse |
| 2.2 Evaluierung und Interpretation der Ergebnisse |
| 3. Abschlussbericht |
| 3.1 Testbericht |
| 4. Literatur |
| Anlage 1 Mehrstufiger Hydrolyse-Testablauf |
| Anlage 2 Definitionen und Einheiten |
| Anlage 3 Puffersysteme |
| A. CLARK and LUBS: |
| B. KOLTHOFF und VLEESCHHOUWER: |
| C. SÖRENSEN: |
| C.8 Toxizität für Regenwürmer |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definition und Messgröße |
| 1.3 Referenzsubstanz |
| 1.4 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung des Prüfverfahrens |
| 1.6.1 Material |
| 1.6.1.1 Prüfsubstrat |
| 1.6.1.2 Prüfgefäße |
| 1.6.2 Prüfbedingungen |
| 1.6.3 Prüfverfahren |
| 1.6.4 Prüforganismen |
| 2. Daten |
| 2.1 Verarbeitung und Auswertung der Ergebnisse |
| 3. Abschlussbericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 4. Literatur |
| Anlage Anzucht und Haltung der Würmer vor der Prüfung |
| C.9 Biologische Abbaubarkeit |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Prüfverfahren |
| 1.6.1 Vorbereitung |
| 1.6.1.1 Reagenzien |
| 1.6.1.2 Geräte |
| 1.6.1.3 Vorbereitung des Inokulums |
| 1.6.1.4 Zubereitung der Testlösungen |
| 1.6.2 Durchführung der Prüfung |
| 2. Daten und Auswertung |
| 3. Schlussbericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 3.2 Interpretation der Ergebnisse |
| 4. Literatur |
| Anlage Beispiel einer Auswertung |
| Abbildung 1 Beispiele von Abbau-Kurven |
| Abbildung 2 Beispiel für eine Adaptation des Schlammes |
| C.10 Simulation der aeroben Abwasserbehandlung |
| C.10-A: Belebtschlamm |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Negative/positive Testergebnisse (Pass/Fail) |
| Referenzsubstanzen |
| Reproduzierbarkeit von Testergebnissen |
| Beschreibung des Prüfverfahrens |
| Prüfverfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 |
| Abbildung 1 Apparatur zur Bestimmung der biologischen Abbaubarkeit |
| Abbildung 2 Apparatur zur Bestimmung der biologischen Abbaubarkeit |
| Abbildung 3 Einzelheiten des 3-Liter-,Porous-Pot'-Belüftungsgefäßes |
| Anlage 2 Beispiel einer Eliminationskurve |
| Anlage 3 [Zur Information] |
| Anlage 4 Beurteilung der Belebtschlamm-Inhibition |
| Anlage 5 Schwer wasserlösliche Prüfsubstanzen - flüchtige chemische Substanzen |
| Anlage 6 Auswirkungen der Schlammverweilzeit auf die Behandlungsfähigkeit chemischer Substanzen |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Angaben zur Prüfsubstanz |
| Negative/positive Testergebnisse (Pass/Fail) |
| Referenzsubstanz |
| Reproduzierbarkeit von Testergebnissen |
| Beschreibung der Methode |
| Prüfverfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage 6.1 ,Porous Pot' mit SRT-Kontrolle |
| Anlage 6.2 Berechnung von kinetischen Konstanten |
| Abbildung 1 Drei Temperaturen; fünf Schlammverweilzeiten (SRT) |
| Abbildung 2 Regressionsgerade SRT - S1 vs S1 bei Temperatur T = 5 °C |
| Anlage 7 Tests bei niedrigen (μg/l) Konzentrationsbereichen |
| C.10-B: Biofilme |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Angaben zur Prüfsubstanz |
| Negative/positive Testergebnisse (Pass/Fail) |
| Referenzsubstanzen |
| Reproduzierbarkeit von Testergebnissen |
| Beschreibung des Prüfverfahrens |
| Prüfverfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage 8 |
| Abbildung 1 Drehrohre |
| Abbildung 2 Fließdiagramm |
| C.11 Belebtschlamm, Prüfung der Atmungshemmung (Kohlenstoff- und Ammoniumoxidation) |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Informationen zur Prüfchemikalie |
| Anwendbarkeit der Prüfmethode |
| Referenzchemikalien |
| Validitätskriterien und Reproduzierbarkeit |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Prüfverfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Messgeräte (Beispiele) |
| Anlage 3 Messgerät (Beispiel) mit einer BSB-Flasche |
| Anlage 4 Hemmkurven (Beispiel) |
| C.12 Biologische Abbaubarkeit modifizierter SCAS-Test |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen und Einheiten |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Methode |
| 1.5 Qualitätskriterien |
| 1.6 Prüfverfahren |
| 1.6.1 Vorbereitung |
| 1.6.2 Prüfbedingungen |
| 1.6.3 Durchführung der Prüfung |
| 2. Daten und Auswertung |
| 3. Abschlussbericht |
| 3.1 Prüfbericht |
| 3.2 Interpretation der Ergebnisse |
| 4. Literatur |
| Anlage 1 SCAS-Test: Beispiel der Ergebniseingabe |
| Anlage 2 Beispiel der Testapparatur |
| Abbildung 1 |
| C.13 Bioakkumulationsprüfung am Fisch mit aquatischer Exposition und Exposition über das Futter |
| Einleitung |
| C.13-I Biokonzentrationsprüfung am Fisch mit aquatischer Exposition |
| Testprinzip |
| Angaben zum Prüfstoff |
| Gültigkeit des Tests |
| Referenzstoffe |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Prüfungsablauf |
| Daten und Berichterstattung |
| C.13-II Fischtest - Minimale aquatische Exposition |
| Einleitung |
| Probenahmeplan für minimierte Versuche |
| C.13-III Bioakkumulationstest an Fischen - Exposition über das Futter |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Angaben zum Prüfstoff |
| Validität der Prüfung |
| Referenzstoffe |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Durchführung des Tests |
| Daten und Berichterstattung |
| Literaturhinweise |
| Anlagen |
| Anlage 1 Definitionen und Einheiten |
| Literaturhinweise |
| Anlage 2 Chemische Eigenschaften eines geeigneten Verdünnungswassers |
| Anlage 3 Für die Prüfung empfohlene Fischarten |
| Anlage 4 Probenahmepläne für Prüfungen mit aquatischer Exposition und mit Exposition über das Futter |
| 1. Hypothetisches Beispiel eines Probenahmeplans für die vollständige Biokonzentrationsprüfung mit aquatischer Exposition eines Stoffs mit log KOW = 4 |
| 2. Hypothetisches Beispiel eines Probenahmeplans für die Bioakkumulationsprüfung eines Stoffs mit Exposition über das Futter nach 10 Tagen Aufnahme und 42 Tagen Ausscheidung |
| Anlage 5 Allgemeine Berechnungen |
| 1. Einleitung |
| 2. Vorabschätzung der Dauer der Aufnahmephase |
| 3. Vorabschätzung der Dauer der Ausscheidungsphase |
| 4. Sequentielle Methode: Bestimmung der Ausscheidungs-(Eliminations-)konstanten k2 |
| 5. Sequenzielle Methode: Bestimmung der Aufnahmekonstanten k1 (nur bei aquatischer Exposition) |
| 6. Simultane Methode für die Berechnung der Aufnahme- und der Ausscheidungskonstanten (nur bei aquatischer Exposition) |
| 7. Korrektur um den Effekt der Verdünnung durch Wachstum zur Bestimmung des kinetischen BCF und des BMF |
| 8. Normalisierung des Lipidgehalts auf 5 % (nur bei aquatischer Exposition) |
| Literaturhinweise |
| Anlage 6 Gleichungen für den Versuch mit aquatischer Exposition: Minimierter Versuchsplan |
| Anlage 7 Gleichungen für die Prüfung mit Exposition über das Futter |
| 1. Beispiel der Zusammensetzung eines geeigneten handelsüblichen Fischfutters |
| 2. Beispiele für Futterdotierungstechniken |
| 3. Berechnung der Assimilationseffizienz und des Biomagnifikationsfaktors |
| 4. Korrektur um den Lipidgehalt |
| 5. Bewertung der Unterschiede zwischen der gemessenen Konzentration zum Zeitpunkt Null (C0,m) und der abgeleiteten Konzentration zum Zeitpunkt Null (C0,d) |
| 6. Empfehlungen für sehr schnell ausgeschiedene Prüfstoffe |
| Anlage 8 Ansätze zur Schätzung vorläufiger BCF-Werte anhand von Daten aus dem Versuch mit Exposition über das Futter |
| C.14 Wachstumstest an Jungfischen |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Begriffsbestimmungen |
| 1.3 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.4 Angaben zur Prüfsubstanz |
| 1.5 Validität des Tests |
| 1.6 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.6.1 Apparatur |
| 1.6.2 Wasser |
| 1.6.3 Testlösungen |
| 1.6.4 Auswahl der Spezies |
| 1.6.5 Haltung der Fische |
| 1.7 Versuchsaufbau |
| 1.7.1 Versuchsaufbau für die Regressionsanalyse |
| 1.7.2 Versuchsaufbau für die Bestimmung der NOEC/LOEC mittels Varianzanalyse |
| 1.8 Verfahren |
| 1.8.1 Auswahl und Wiegen der Versuchsfische |
| 1.8.2 Expositionsbedingungen |
| 1.8.2.1 Dauer |
| 1.8.2.2 Besatzrate und Besatzdichte |
| 1.8.2.3 Fütterung |
| 1.8.2.4 Licht und Temperatur |
| 1.8.3 Testkonzentrationen |
| 1.8.4 Kontrollen |
| 1.8.5 Häufigkeit der analytischen Bestimmungen und Messungen |
| 1.8.6 Anmerkungen |
| 2. Daten und Berichterstattung |
| 2.1 Behandlung der Ergebnisse |
| 2.1.1 Analyse der Ergebnisse mittels Regression (Konzentrations-Wirkungs-Modell) |
| 2.1.2 Analyse der Ergebnisse zur Bestimmung der LOEC |
| 2.2 Interpretation der Ergebnisse |
| 2.3 Testbericht |
| 2.3.1 Prüfsubstanz: |
| 2.3.2 Testspezies: |
| 2.3.3 Prüfbedingungen: |
| 2.3.4 Ergebnisse: |
| 3. Literatur |
| Anlage 1 Für die Prüfung empfohlene Fischspezies und geeignete Prüfbedingungen |
| Anlage 2 Einige chemische Eigenschaften von geeignetem Verdünnungswasser |
| Anlage 3 Logarithmische Reihe geeigneter Konzentrationen für den Toxizitätstest |
| C.15 Fische, kurzfristige Toxizitätsprüfung an Embryonen und Jungfischen mit Dottersack |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Prinzip der Methode |
| 1.4 Informationen über die Prüfsubstanz |
| 1.5 Validitätskriterien |
| 1.6 Beschreibung der Methode |
| 1.6.1 Prüfkammern |
| 1.6.2 Auswahl der Fischarten |
| 1.6.3 Haltung der Zuchtfische |
| 1.6.4 Handhabung von Embryonen und Larven |
| 1.6.5 Wasser |
| 1.6.6 Prüflösungen |
| 1.7 Vorgehensweise |
| 1.7.1 Expositionsbedingungen |
| 1.7.1.1 Dauer |
| 1.7.1.2 Besatz |
| 1.7.1.3 Licht und Temperatur |
| 1.7.2 Prüfkonzentrationen |
| 1.7.3 Kontrollen |
| 1.7.4 Häufigkeit von analytischen Bestimmungen und Messungen |
| 1.7.5 Beobachtungen |
| 1.7.5.1 Stadium der Embryonalenwicklung |
| 1.7.5.2 Schlüpfen und Überleben |
| 1.7.5.3 Abnormes Aussehen |
| 1.7.5.4 Abnormes Verhalten |
| 1.7.5.5 Länge |
| 1.7.5.6 Gewicht |
| 2. Daten und Berichterstattung |
| 2.1 Auswertung der Ergebnisse |
| 2.2 Interpretation der Ergebnisse |
| 2.3 Abschlussbericht |
| 2.3.1 Prüfsubstanz |
| 2.3.2 Geprüfte Fischart |
| 2.3.3 Prüfbedingungen |
| 2.3.4 Ergebnisse |
| 3. Literaturhinweise |
| Tabelle 1A Für die Prüfung empfohlene Fischarten |
| Tabelle 1B Beispiele für andere hinreichend dokumentierte Arten, die ebenfalls verwendet wurden |
| Anlagen |
| Anlage 1 Anleitung zur Durchführung einer Toxizitätsprüfung an Embryonen und Jungtieren mit Dottersack des Zebrabärblings (Brachydanio rerio) |
| Anlage 2 Prüfbedingungen, Dauer und Überlebenskriterien für empfohlene Fischarten |
| Anlage 3 Prüfbedingungen, Dauer und Überlebenskriterien für andere hinreichend dokumentierte Fischarten |
| Anlage 4 Verschiedene chemische Eigenschaften eines annehmbaren Verdünnungswassers |
| C.16 Honigbienen - Akute orale Toxizitätsprüfung |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Begriffsbestimmungen |
| 1.3 Prinzip der Methode |
| 1.4 Validitätskriterien |
| 1.5 Beschreibung der Methode |
| 1.5.1 Sammlung der Bienen |
| 1.5.2 Unterbringungs- und Fütterungsbedingungen |
| 1.5.3 Vorbereitung der Bienen |
| 1.5.4 Herstellung der Dosen |
| 1.6 Vorgehensweise |
| 1.6.1 Prüf- und Kontrollgruppen |
| 1.6.2 Toxischer Standard |
| 1.6.3 Exposition |
| 1.6.3.1 Verabreichung der Dosen |
| 1.6.3.2 Dauer |
| 1.6.4 Beobachtungen |
| 1.6.5 Limit-Test |
| 2. Daten und Berichterstattung |
| 2.1 Daten |
| 2.2 Prüfbericht |
| 2.2.1 Prüfsubstanz |
| 2.2.2 Geprüfte Bienenart |
| 2.2.3 Prüfbedingungen |
| 2.2.4 Ergebnisse |
| 3. Literaturhinweise |
| C.17 Honigbienen - Akute Kontakttoxizitätsprüfung |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Begriffsbestimmungen |
| 1.3 Prinzip der Methode |
| 1.4 Validitätskriterien |
| 1.5 Beschreibung der Methode |
| 1.5.1 Sammlung der Bienen |
| 1.5.2 Unterbringungs- und Fütterungsbedingungen |
| 1.5.3 Vorbereitung der Bienen |
| 1.5.4 Herstellung der Dosen |
| 1.6 Vorgehensweise |
| 1.6.1 Prüf- und Kontrollgruppen |
| 1.6.2 Toxischer Standard |
| 1.6.3 Exposition |
| 1.6.3.1 Verabreichung der Dosen |
| 1.6.3.2 Dauer |
| 1.6.4 Beobachtungen |
| 1.6.5 Limit-Test |
| 2. Daten und Berichterstattung |
| 2.1 Daten |
| 2.2 Prüfbericht |
| 2.2.1 Prüfsubstanz |
| 2.2.2 Geprüfte Bienenart |
| 2.2.3 Prüfbedingungen |
| 2.2.4 Ergebnisse |
| 3. Literaturhinweise |
| C.18 Adsorption/Desorption nach einer Schüttelmethode |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Anwendungsbereich |
| 1.3 Begriffsbestimmungen und Einheiten |
| 1.4 Prinzip der Testmethode |
| 1.5 Angaben zur Testsubstanz |
| 1.6 Anwendbarkeit des Tests |
| 1.7 Beschreibung der Methode |
| 1.7.1 Geräte und chemische Reagenzien |
| 1.7.2 Charakterisierung und Auswahl von Böden |
| Tabelle 1: Anleitung zur Auswahl von Bodenproben zur Adsorption/Desorption |
| 1.7.3 Sammlung und Lagerung von Bodenproben |
| 1.7.3.1 Sammlung |
| 1.7.3.2 Lagerung |
| 1.7.3.3 Handhabung und Vorbereitung von Bodenproben auf den Test |
| 1.7.4 Vorbereitung der Testsubstanz zur Anwendung auf Boden |
| 1.8 Voraussetzungen für die Durchführung des Adsorptions-/Desorptionstests |
| 1.8.1 Analysenmethode |
| 1.8.2 Auswahl optimaler Boden-Lösungs-Verhältnisse |
| Abbildung 1: Beziehung zwischen Boden-Lösungs-Verhältnissen und Kd bei verschiedenen Anteilen adsorbierter Testsubstanz |
| 1.9 Durchführung des Tests |
| 1.9.1 Testbedingungen |
| 1.9.2 Stufe 1 - Voruntersuchung |
| 1.9.2.1 Auswahl optimaler Boden-Lösungs-Verhältnisse |
| 1.9.2.2 Bestimmung der Zeit zur Einstellung des Adsorptionsgleichgewichts und der bei Gleichgewicht adsorbierten Menge Testsubstanz |
| 1.9.2.3 Adsorption an der Oberfläche des Testgefäßes und Stabilität der Testsubstanz |
| 1.9.3 Stufe 2 - Adsorptionskinetik bei einer Konzentration der Testsubstanz |
| 1.9.4 Stufe 3 - Adsorptionsisothermen und Desorptionskinetik/Desorptionsisothermen |
| 1.9.4.1 Adsorptionsisothermen |
| 1.9.4.2 Desorptionskinetik |
| 1.9.4.3 Desorptionsisothermen |
| 2. Daten und Abschlussbericht |
| 2.1 Adsorption |
| 2.1.1 Adsorptionsisothermen |
| Abbildung 2: Freundlich-Adsorptionskurve, normal und linearisiert |
| 2.1.2 Massenbilanz |
| 2.2 Desorption |
| 2.2.1 Desorptionsisothermen |
| 2.2.2 Testbericht |
| 3. Literaturangaben |
| Anlagen |
| Anlage 1 Testplan |
| Anlage 2 Einfluss der Genauigkeit der Analysenmethode und der Konzentrationsveränderung auf die Genauigkeit von Adsorptionsergebnissen |
| Anlage 3 Abschätzungsverfahren für Kd |
| Tabelle 1. Beispielhafte Korrelationen zwischen dem Adsorptionsverteilungskoeffizienten und dem Oktanol-Wasser-Verteilungskoeffizienten |
| Tabelle 2. Beispielhafte Korrelationen zwischen dem Adsorptionsverteilungskoeffizienten und der Wasserlöslichkeit |
| Anlage 4 Berechnungen zur Festlegung der Zentrifugationsbedingungen |
| Abb. 1a. Variationen der Zentrifugationszeit (Bodendichte) |
| Abb. 1b. Variationen der Zentrifugationszeit (Längen im Gemisch) |
| Anlage 5 Berechnung von Adsorption A (%) und Desorption D (%) |
| Abb. 1. Grafische Darstellung eines Adsorptionsgleichgewichts |
| Abb. 2. Massenkonzentration der Testsubstanz in der wässrigen Phase (Caq) in Abhängigkeit von der Zeit |
| Anlage 6 Adsorption-Desorption in Böden: Datenberichtsformulare |
| C.19 Schätzung des Adsorptionskoeffizienten (Koc) im Boden und in Klärschlamm mittels der Hochdruck-Flüssigchromatografie (HPLC) |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Testmethode |
| 1.5 Anwendbarkeit des Tests |
| 1.6 Qualitätskriterien |
| 1.6.1 Genauigkeit |
| 1.6.2 Wiederholbarkeit |
| 1.6.3 Reproduzierbarkeit |
| 1.7 Beschreibung der Testmethode |
| 1.7.1 Vorbereitende Schätzung des Adsorptionskoeffizienten |
| 1.7.2 Geräte |
| 1.7.3 Mobile Phasen |
| 1.7.4 Gelöste Stoffe |
| 1.8 Durchführung des Tests |
| 1.8.1 Testbedingungen |
| 1.8.2 Bestimmung der Totzeit to |
| 1.8.2.1 Bestimmung der Totzeit to durch eine homologe Reihe |
| 1.8.2.2 Bestimmung der Totzeit to durch inerte Stoffe, bei denen keine Retention durch die Säule auftritt |
| 1.8.3 Bestimmung der Retentionszeiten tR |
| 1.8.4 Bewertung |
| 2. Daten und Berichterstattung |
| 3. Literaturhinweise |
| Anlage |
| Tabelle 1: Vergleich von Koc-Werten für Böden und Klärschlämme, und mittels der HPLC-Screeningmethode berechneten Werten |
| Tabelle 2: Ergebnisse eines Ringversuchs (11 teilnehmende Laboratorien) zur Verbesserung und Validierung der HPLC-Methode |
| Tabelle 3: Empfohlene Referenzsubstanzen für die HPLC-Screeningmethode auf der Grundlage von Bodenadsorptionsdaten |
| C.20Daphnia magna-Reproduktionstest |
| Einleitung |
| Testprinzip |
| Angaben zur Prüfchemikalie |
| Validitätskriterien |
| Beschreibung der Methode |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literaturhinweise |
| Anlagen |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Herstellung der vollständig definierten Medien Elendt M7 und M4 |
| Anlage 3 Analyse des gesamten organischen Kohlenstoffs (TOC) und Erstellung von Nomogrammen für den TOC-Gehalt von Algenfutter |
| Anlage 4 Beispieldatenblatt zur Protokollierung der Erneuerung des Prüfmediums, von physikalisch-chemischen Überwachungsdaten, der Fütterung, Daphnien-Reproduktion und Mortalität von Elterntieren |
| Anlage 5 Beispieldatenblatt für die Protokollierung der Ergebnisse der chemischen Analyse |
| a) Gemessene Konzentrationen |
| b) Gemessene Konzentrationen in Prozent der Nominalkonzentrationen |
| Anlage 6 Berechnung eines zeitgewichteten Mittels |
| Abbildung 1 Beispiel für ein zeitgewichtetes Mittel |
| Tabelle 1 Berechnung des zeitgewichteten Mittels |
| Anlage 7 Leitfaden für die Geschlechtsbestimung bei frisch geschlüpften Daphnien |
| Abbildung 1 24 Stunden altes Männchen (links) und Weibchen (rechts) der Art D. magna. |
| C.21 Bodenmikroorganismen: Stickstofftransformationsstest |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Testmethode |
| 1.5 Validität des Tests |
| 1.6 Beschreibung der Testmethode |
| 1.6.1 Geräte |
| 1.6.2 Auswahl und Anzahl der Röden |
| 1.6.3 Entnahme und Lagerung von Bodenproben |
| 1.6.3.1 Entnahme |
| 1.6.3.2 Lagerung |
| 1.6.4 Handhabung und Vorbereitung des Bodens für den Test |
| 1.6.4.1 Vorinkubation |
| 1.6.4.2 Physikalisch-chemische Eigenschaften |
| 1.6.4.3 Anreicherung mit organischem Substrat |
| 1.6.5 Vorbereitung der Testsubstanz zur Applikation auf den Boden |
| 1.6.6 Testkonzentrationen |
| 1.7 Durchführung des Tests |
| 1.7.1 Expositionsbedingungen |
| 1.7.1.1 Behandlung und Kontrolle |
| 1.7.1.2 Inkubation von Bodenproben |
| 1.7.1.3 Testbedingungen und -dauer |
| 1.7.2 Probenahme und Analyse von Böden |
| 1.7.2.1 Probenahmeintervalle |
| 1.7.2.2 Analyse von Bodenproben |
| 2. Daten |
| 2.1 Aufbereitung der Ergebnisse |
| 2.2 Interpretation der Ergebnisse |
| 3. Abschlussbericht |
| 4. Literaturangaben |
| C.22 Bodenmikroorganismen: Kohlenstofftransformationstest |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Prinzip der Testmethode |
| 1.5 Validität des Tests |
| 1.6 Beschreibung der Testmethode |
| 1.6.1 Geräte |
| 1.6.2 Auswahl und Anzahl der Böden |
| 1.6.3 Entnahme und Lagerung von Bodenproben |
| 1.6.3.1 Entnahme |
| 1.6.3.2 Lagerung |
| 1.6.4 Handhabung und Vorbereitung des Bodens für den Test |
| 1.6.4.1 Vorinkubation |
| 1.6.4.2 Physikalischchemische Eigenschaften |
| 1.6.5 Vorbereitung der Testsubstanz zur Applikation auf den Boden |
| 1.6.6 Testkonzentrationen |
| 1.7 Durchführung des Tests |
| 1.7.1 Expositionsbedingungen |
| 1.7.1.1 Behandlung und Kontrolle |
| 1.7.1.2 Inkubation von Bodenproben |
| 1.7.1.3 Testbedingungen und -dauer |
| 1.7.2 Probenahme und Analyse von Böden |
| 1.7.2.1 Probenahmeintervalle |
| 1.7.2.2 Messung von Glucoseinduzierten Respirationsraten |
| 2. Daten |
| 2.1 Aufbereitung der Ergebnisse |
| 2.2 Interpretation der Ergebnisse |
| 3. Abschlussbericht |
| 4. Literaturangaben |
| C.23 Aerobe und anaerobe Transformation im Boden |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Anwendbarkeit des Tests |
| 1.5 Informationen zur Testsubstanz |
| 1.6 Prinzip der Testmethode |
| 1.7 Qualitätskriterien |
| 1.7.1 Wiederfindungsraten |
| 1.7.2 Wiederholbarkeit und Empfindlichkeit der Analysenmethode |
| 1.7.3 Genauigkeit der Transformationsdaten |
| 1.8 Beschreibung der Testmethode |
| 1.8.1 Geräte und chemische Reagenzien |
| 1.8.2 Applikation der Testsubstanz |
| 1.8.3 Böden |
| 1.8.3.1 Bodenauswahl |
| 1.8.3.2 Probenahme, Handhabung und Lagerung von Böden |
| 1.9 Durchführung des Tests |
| 1.9.1 Testbedingungen |
| 1.9.1.1 Testtemperatur |
| 1.9.1.2 Feuchtegehalt |
| 1.9.1.3 Aerobe Inkubationsbedingungen |
| 1.9.1.4 Sterile aerobe Bedingungen |
| 1.9.1.5 Anaerobe Inkubationsbedingungen |
| 1.9.1.6 Inkubation unter Reisfeldbedingungen |
| 1.9.1.7 Testdauer |
| 1.9.2 Durchführung des Tests |
| 1.9.3 Probenahme und Messung |
| 1.9.4 Fakultative Tests |
| 2. Daten |
| 2.1 Aufbereitung der Ergebnisse |
| 2.2 Evaluierung und Interpretation der Ergebnisse |
| 3. Abschlussbericht |
| 4. Literaturangaben |
| Anlage 1 Wasserspannung, Feldkapazität (FK) und Wasserhaltekapazität (WHK) |
| Anlage 2 Bodenfeuchtegehalt (in g Wasser je 100 g Boden TG) verschiedener Bodenarten aus unterschiedlichen Ländern |
| Anlage 3 |
| Abbildung 1 Beispiel eines Durchflussapparats für die Untersuchung der Transformation von Chemikalien im Boden |
| Abbildung 2 Beispiel eines Biometergefäßes für die Untersuchung der Transformation von Chemikalien im Boden |
| C.24 Aerobe und anaerobe Transformation in Wasser-Sediment-Systemen |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Definitionen |
| 1.3 Referenzsubstanzen |
| 1.4 Informationen zur Testsubstanz |
| 1.5 Prinzip der Testmethode |
| 1.6 Anwendbarkeit des Tests |
| 1.7 Qualitätskriterien |
| 1.7.1 Wiederfindungsraten |
| 1.7.2 Wiederholbarkeit und Empfindlichkeit der Analysenmethode |
| 1.7.3 Genauigkeit der Transformationsdaten |
| 1.8 Beschreibung der Methode |
| 1.8.1 Testsystem und Geräte |
| 1.8.2 Auswahl und Anzahl von Wassersedimenten |
| 1.8.2.1 Sedimentauswahl |
| 1.8.2.2 Charakterisierung von Wasser-Sediment-Proben |
| 1.8.3 Probenahme, Handhabung und Lagerung |
| 1.8.3.1 Probenahme |
| 1.8.3.2 Handhabung |
| 1.8.3.3 Lagerung |
| 1.8.4 Vorbereitung der Sediment-/Wasserproben für den Test |
| 1.9 Durchführung des Tests |
| 1.9.1 Testbedingungen |
| 1.9.2 Behandlung und Applikation der Testsubstanz |
| 1.9.3 Testdauer und Probenahme |
| 1.9.4 Fakultative Voruntersuchung |
| 1.9.5 Messungen und Analyse |
| 2. Daten |
| 2.1 Aufbereitung der Ergebnisse |
| 3. Abschlussbericht |
| 3.1 Testbericht |
| 4. Literaturangaben |
| Anlagen |
| Anlage 1 Anleitung zu den aeroben und den anaeroben Testsystemen |
| Anlage 2 Beispiel eines Durchflusssystems |
| Anlage 3 Beispiel eines Biometersystems |
| Anlage 4 Beispielrechnung für die Applikationsdosis in Testgefäßen |
| C.25 Aerobe Mineralisation in Oberflächenwasser - Simulationstest zur biologischen Abbaubarkeit |
| 1. Methode |
| 1.1 Einleitung |
| 1.2 Begriffsbestimmungen |
| 1.3 Anwndbarkeit der Prüfmethode |
| 1.4 Prinzip der Prüfmethode |
| 1.5 Informationen zur Prüfsubstanz |
| 1.6 Referenzsubstanz |
| 1.7 Qualitätskriterien |
| 1.7.1 Wiederfindungsraten |
| 1.7.2 Wiederholbarkeit und Empfindlichkeit der Analysemethode |
| 1.8 Beschreibung der Prüfmethode |
| 1.8.1 Apparatur |
| 1.8.2 Stammlösungen der Prüfsubstanz |
| 1.8.3 Entnahme und Transport von Oberflächenwasser |
| 1.8.4 Lagerung und Vorbereitung des Oberflächenwassers |
| 1.8.5 Vorbereitung von mit Sedimenten aufbereitetem Wasser (fakultativ) |
| 1.8.6 Semikontinuierliches Verfahren (fakultativ) |
| 1.8.7 Zugabe der Prüfsubstanz (bzw. der Referenzsubstanz) |
| 1.8.8 Prüfbedingungen |
| 1.8.8.1 Testtemperatur |
| 1.8.8.2 Vermischung |
| 1.8.8.3 Testdauer |
| 1.8.9 Verfahren |
| 1.8.9.1 Vorbereitung der Kolben für den pelagischen Test |
| 1.8.9.2 Anzahl der Kolben und Proben |
| 1.8.9.3 Vorbereitung der Kolben für Tests mit suspendierten Sedimenten (fakultativ) |
| 1.8.9.4 Radiochemische Bestimmungen |
| 1.8.9.5 Spezifische chemische Analyse |
| 2. Daten und Abschlussbericht |
| 2.1 Behandlung der Ergebnisse |
| 2.1.1 Grafische Darstellung der Daten |
| 2.1.2 Restaktivität |
| 2.2 Auswertung der Ergebnisse |
| 2.3 Validität des Tests |
| 3. Prüfbericht |
| 4. Literatur |
| Anhang 1 Phasenverteilung14C |
| Anhang 2 Semikontinuierliches Verfahren |
| Anhang 3 Bestimmung des14CO2-Anteils |
| Abbildung 1a Beispiel einer arithmetischen Darstellung der Daten (Restaktivität/Zeit) |
| Abbildung 1b Beispiel einer semilogarithmischen Darstellung der Daten (In Restaktivität/Zeit) |
| C.26 LEMNa SP. - Wachstumsinhibitionstest |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Informationen zur Prüfchemikalie |
| Validität des Tests |
| Referenzchemikalie |
| Beschreibung der Methode |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Beschreibung Lemna spp. |
| Literatur |
| Anlage 3 Haltung der Stammkultur |
| Anlage 4 Medien |
| C.27 Chironomiden-Toxizitätstest in Sediment-Wasser-Systemen mit gespiktem Sediment |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Angaben zur Prüfsubstanz |
| Referenzsubstanzen |
| Gültigkeit der Ergebnisse |
| Beschreibung der Methode |
| Versuchsaufbau |
| Prüfverfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Empfehlungen für die Anzucht von Chironomus riparius |
| Tabelle 1: Stammlösungen der Spurenelemente für das M4- und das M7-Medium |
| Tabelle 2: Makronährstoff-Stammlösungen für das M4- und das M7-Medium |
| Tabelle 3: Vitamin-Stammlösung für das M4- und das M7-Medium |
| Anlage 3 Zubereitung des formulierten Sediments |
| Anlage 4 Chemische Eigenschaften eines geeigneten Verdünnungswassers |
| Anlage 5 Empfehlungen für die Beobachtung des Schlüpfens der Chironomidenlarven |
| C.28 Chironomiden-Toxizitätstest in Sediment-Wasser-Systemen mit gespiktem Wasser |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Angaben zur Prüfsubstanz |
| Referenzsubstanzen |
| Gültigkeit der Ergebnisse |
| Beschreibung der Methode |
| Versuchsaufbau |
| Prüfverfahren |
| Beobachtungen |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Empfehlungen für die Anzucht von Chironomus riparius |
| Tabelle 1: Stammlösungen der Spurenelemente für das M4- und das M7-Medium |
| Tabelle 2: Makronährstoff-Stammlösung für das M4- und das M7-Medium |
| Tabelle 3: Vitamin-Stammlösung für das M4- und das M7-Medium |
| Anlage 3 Zubereitung des formulierten Sediments |
| Anlage 4 Chemische Eigenschaften eines geeigneten Verdünnungswassers |
| Anlage 5 Empfehlungen für die Beobachtung des Schlüpfens der Chironomidenlarven |
| C.29 Leichte biologische Abbaubarkeit - Bestimmung von CO2 in geschlossenen Flaschen (headspace-Test) |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Angaben zur Prüfsubstanz |
| Anwendungsbereich der Methode |
| Referenzsubstanzen |
| Reproduzierbarkeit |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Prüfverfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage 1 Abkürzungen und Definitionen |
| Anlage 2 Beispiel einer Abbaukurve |
| Abbildung 1 Bioabbau von Octan-1-ol im CO2-headspace-Test |
| C.30 Bioakkumulation in terrestrischen Oligochaeten |
| Einleitung |
| Voraussetzungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Gültigkeit des Tests |
| Beschreibung der Methode |
| Prüfverfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Berechnung der Aufnahme- und Eliminationsparameter |
| Anlage 3 Probenahmeplan für die Testung der Bioakkumulation im Boden-Beispiele |
| Anlage 4 Kunsterde - Empfehlungen für die Zubereitung und Lagerung |
| Anlage 5 Als Testspezies für die Bestimmung der Bioakkumulation aus dem Boden empfohlene Arten terrestrischer Oligochaeten |
| C.31 Wachstumstest bei Landpflanzen: Untersuchung von Auflauf und Wachstum von Keimlingen |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Informationen zur Prüfchemikalie |
| Validität des Tests |
| Referenzchemikalie |
| Beschreibung der Methode |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Liste der Üblicherweise für Pflanzentests verwendeten Arten |
| Anlage 3 Liste potenzieller Nichtkulturpflanzen |
| Anlage 4 Beispiele für geeignete Wachstumsbedingungen für bestimmte Pflanzenarten |
| C.32 Enchytraeen-Reproduktionstest |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Informationen zur Prüfchemikalie |
| Validität des Tests |
| Referenzchemikalie |
| Beschreibung des Tests |
| Durchführung der Tests |
| Daten und Berichterstattung |
| Prüfbericht |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Bestimmung der maximalen Wasserhaltekapazität |
| Anlage 3 Bestimmung des pH-Wertes von Böden |
| Anlage 4 Kulturbedingungen für Enchytraeus sp. |
| Anlage 5 Durchführung der Prüfung mit anderen Enchytraeus-Arten |
| Anlage 6 Detaillierte Beschreibung der Entnahmeverfahren |
| Anlage 7 Überblick über die statistische Auswertung der Daten (NOEC-Bestimmung) |
| C.33 Reproduktionstest mit Regenwürmern (Eisenia Fetida/Eisenia Andrei) |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Angaben zur Prüfchemikalie |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Prüfbericht |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Bestimmung der maximalen Wasserhaltekapazität des künstlichen Bodens |
| Anlage 3 Bestimmung des pH-Wertes von Böden |
| Anlage 4 Anzucht von Eisenia fetida/Eisenia andrei |
| Anlage 5 Verfahren zum Zählen der aus den Kokons geschlüpften juvenilen Würmer |
| Anlage 6 Übersicht über die statistische Auswertung der Daten (NOEC-Bestimmung) |
| C.34 Bestimmung der Hemmung Anaerober Bakterien - Reduktion der Gasproduktion von anaerobem Faulschlamm |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfung |
| Angaben zur Prüfchemikalie |
| Anwendungsbereich der Methode |
| Referenzchemikalien |
| Beschreibung der Methode |
| Interferenzen/Fehler |
| Prüfverfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Muster einer Apparatur zur Messung der Biogasproduktion anhand des Gasdrucks |
| Anlage 2 Umrechnung der Druckmesswerte |
| Anlage 3 Bekannte Faktoren, die Ergebnisse verfälschen können |
| Anlage 4 Anwendung auf Umweltproben mit niedriger Biomassekonzentration - Anaerobe Schlämme, Sedimente usw. |
| Anlage 5 Begriffsbestimmungen |
| C.35 Sediment-Wasser-Toxizitätsstudie mit Dotiertem Sediment an Lumbriculus |
| Einleitung |
| Voraussetzungen und praktische Hinweise |
| Testprinzip |
| Referenzprüfung |
| Validität des Tests |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Durchführung der Prüfung |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Zusammensetzung des empfohlenen rekonstituierten Wassers (übernommen aus Kapitel C.1 dieses Anhangs (1)) |
| Anlage 3 Physikalisch-Chemische Eigenschaften eines geeigneten Testwassers |
| Anlage 4 Empfohlenes künstliches Sediment - Empfehlungen für Herstellung und Lagerung |
| Anlage 5 Kulturmethoden für Lumbriculus variegatus |
| Anlage 6 Zusammenfassung der Ergebnisse des Ringtests |
| Tabelle 1: Ergebnisse der einzelnen Ringtestdurchläufe: durchschnittliche Anzahl Würmer in den Kontrollen und in den Lösungsmittelkontrollen bei Testende; SD = Standardabweichung; CV = Variationskoeffizient |
| Tabelle 2: Ergebnisse der einzelnen Ringtestdurchläufe: durchschnittliches Gesamttrockengewicht der Würmer pro Replikat in den Kontrollen und in den Lösungsmittelkontrollen bei Testende; SD = Standardabweichung; CV = Variationskoeffizient |
| Tabelle 3: PCP-Toxizität: Zusammenfassung der Endpunkte im Ringtest; Durchschnittswerte der beteiligten Labors für EC50, NOEC und LOEC; SD = Standardabweichung; CV = Variationskoeffizient |
| C.36 Reproduktionstest mit Raubmilben (Hypoaspis (Geolaelaps) Aculeifer) in Bodenproben |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Informationen zur Prüfchemikalie |
| Validität des Tests |
| Referenzchemikalie |
| Beschreibung des Tests |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Bestimmung der maximalen Wasserhaltekapazität des künstlichen Bodens |
| Anlage 3 Bestimmung des pH-Wertes von Böden |
| Anlage 4 Anzucht von Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer und Lebensmittelmilben und Synchronisation der Kulturen |
| Anlage 5 Extraktionsverfahren |
| Anlage 6 Identifizierung von Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer |
| Anlage 7 Basisinformationen zur Biologie von Hypoaspis (Geolaelaps) aculeifer |
| Anlage 8 Zusammenfassung und Zeitrahmen für die wichtigsten Verfahrensschritte zur Durchführung des Hypoaspis-Tests |
| C.37 21-Tage Fisch-Screening-ASSAY: Ein Kurzzeittest zur Bestimmung der Östrogenen und androgenen Aktivität und der Aromatasehemmung |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen und Begrenzungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Gültigkeitskriterien |
| Beschreibung der Methode |
| Versuchsplan |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Leitlinien für die Auswertung und Validität der Testergebnisse |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Abkürzungen und Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Versuchsbedingungen für den Fisch-Screening-Test zur Bestimmung endokriner Wirkungen |
| Anlage 3 Chemische Merkmale eines geeigneten Verdünnungswassers |
| Anlage 4A Laichsubstrat für Zebrabärblinge |
| Anlage 4B Laichsubstrat für Dickkopfelritzen |
| Anlage 5A Bewertung der sekundären Geschlechtsmerkmale bei Dickkopfelritzen zum Nachweis bestimmter Chemikalien mit endokriner Wirkung |
| Anlage 5B Bewertung der sekundären Geschlechtsmerkmale bei Japanischen Reiskärpflingen zum Nachweis bestimmter Chemikalien mit endokriner Wirkung |
| Anlage 6 Empfohlene Verfahren für die Entnahme von Proben für die Vitellogenin-Analyse |
| Verfahren 1A: Dickkopfelritze, Blutentnahme aus der Schwanzvene/-arterie |
| Verfahren 1B: Dickkopfelritze, Blutentnahme aus dem Herzen |
| Verfahren 2A: Japanische Reiskärpflinge, Exzision der Leber |
| Verfahren 2B: Japanische Reiskärpflinge (Oryzias latipes), Vorbehandlung der Leber für die Vitellogenin- Analyse |
| 1. Zugabe des Homogenatpuffers |
| 2. Homogenisieren der Leber |
| 3. Zentrifugen des suspendierten Leberhomogenats |
| 4. Entnahme des Überstands |
| Verfahren 3A: Zebrabärblinge, Blutentnahme aus der Schwanzvene/-arterie |
| Verfahren 3B: Zebrabärblinge, Blutentnahme durch Herzpunktion |
| Verfahren 3C: Standardarbeitsverfahren (SOP): Zebrabärblinge, Homogenisierung von Kopf- und Schwanzgewebe |
| Anlage 7 Vitellogeninangereicherte Proben und Inter-Assay-Referenzstandard |
| Anlage 8 Flussdiagramm als Entscheidungshilfe für die statistischen Analyse |
| C.38 Der Amphibien-Metamorphose-Assay (AMA) |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfung |
| Beschreibung der Methode |
| Tabelle 1: Fütterungsprotokoll bei handelsüblichem Larvenfutter (z.B. Sera Micron ®) in den Validierungsstudien mit X.-laevis-Larven während der Invivo-Phase des AMa mit einem Durchflusssystem |
| Verfahren |
| Tabelle 2: Auffällige morphologische Merkmale von Entwicklungsstadien nach der Beschreibung von Nieuwkoopund Faber |
| Tabelle 3 Zeitpunkte der Beobachtungen zur Kontrolle primärer Endpunkte im AMA |
| Daten und Berichterstattung |
| Tabelle 4. Leistungskriterien des AMA |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 |
| Tabelle 1: Versuchsbedingungen des 21-Tage-Amphibien-Metamorphose-Assay (21-Tage-AMA) |
| Anlage 2 Berichttabellen für Rohdaten und Zusammenfassung |
| Tabelle 1: Allgemeine Informationen zur Prüfchemikalie |
| Tabelle 2: Rohdatenbogen für die Tage 7 und 21 |
| Tabelle 3: Berechnete Summen der Endpunktdaten der Tage 7 und 21 |
| Tabelle 4: Tägliche Mortalität |
| Tabelle 5: Kriterien für die Wasserqualität |
| Tabelle 6: Zusammenfassung chemische Daten |
| Tabelle 7: Histopathologische Berichttabellen - Kernkriterien |
| Tabelle 8: Weitere histopathologische Kriterien |
| Tabelle 9: Ausformulierte Beschreibungen der histopathologischen Ergebnisse |
| Tabelle 10: Zusammenfassende Übersicht Tag x (7 oder 21) des AMA |
| Tabelle 11: Zusammenfassende Übersicht Tag x (7 oder 21) Daten zu Entwicklungsstadien im AMA |
| Anlage 3 Alternative Gewichts- und Längenanalyse in späten Entwicklungsstadien bei > 20 % der Larven in einer oder mehreren Konzentrationen |
| Anlage 4 Begriffsbestimmungen |
| C.39 Collembolen-Reproduktionstests in Böden |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfung |
| Informationen zur Prüfchemikalie |
| Validität des Tests |
| Referenzchemikalie |
| Beschreibung des Tests |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Wesentliche Schritte und Verlauf eines Colembolen-Tests |
| Anlage 3 Leitlinien zur Zucht und zur Synchronisierung von F. fimetaria und F. candida |
| 1. Aufzucht |
| 2. Synchronisierung |
| 3. Alternative Collembolen-Arten |
| Anlage 4 Extraktion und Zählen der Tiere |
| 1. Zwei Extraktionsmethoden kommen in Betracht |
| 2. Zählen |
| Anlage 5 Ermittlung der maximalen Wasserrückhaltefähigkeit des Bodens |
| Anlage 6 pH-Bestimmung des Bodens |
| C.40 Lebenszyklus-Toxizitätstests bei Chironomiden in Sediment-Wasser-Systemen mit dotiertem Sediment |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfung |
| Informationen zur Prüfchemikalie |
| Referenzchemikalien |
| Validität des Tests |
| Beschreibung der Methode |
| Versuchsaufbau |
| Durchführung |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Empfehlungen für die Anzucht von Chironomus riparius |
| Tabelle 1: Stammlösungen der Spurenelemente für das M4- und das M7-Medium |
| Tabelle 2: Makronährstoff-Stammlösung für das M4- und das M7-Medium |
| Tabelle 3: Vitamin-Stammlösung für das M4- und das M7-Medium |
| Literatur |
| Anlage 3 Zubereitung des formulierten Sediments |
| Zusammensetzung des Sediments |
| Zubereitung |
| Lagerung |
| Literatur |
| Anlage 4 Chemische Eigenschaften eines geeigneten Verdünnungswassers |
| Anlage 5 Leitlinien zur Durchführung des Tests |
| C.41 Fish Sexual Development Test (Test zur Geschlechtsentwicklung bei Fischen) |
| Einleitung |
| Tabelle 1: Reaktion der endokrin relevanten Endpunkte auf unterschiedliche Wirkungsweisen von Chemikalien |
| Prinzip der Prüfung |
| Informationen zur Prüfchemikalie |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Abkürzungen und Begriffsbestimmungen |
| Anlage 2 Versuchtsbedingungen des FSDT (Süsswasser-Arten) |
| Anlage 3 Chemische Eigenschaften eines geeigneten Wassers |
| Anlage 4 Aus Prüfmethode C.14 / Leitlinien zu Prüfkonzentrationen |
| Anlage 5 Leitlinien zur Herstellung von Kopf- und Schwanz-Homogenaten von juvenilen Zebrabärblingen, Dickkopfelritzen, Dreistachligen Stichlingen und japanischen Reiskärpflingen |
| Anlage 6 Leitlinien zur Bestimmung der Vitellogenin-Konzentration in Kopf- und Schwanz- Homogenaten von Zebrabärblingen (Danio rerio) (modifiziert nach Holbech et al., 2001); alternativ können auch andere Verfahren unter Verwendung homologer Antikörper und andere Standards angewendet werden |
| Anlage 7 Leitlinien zur Präparation von Gewebeschnitten zur Geschlechtsbestimmung und zur Beurteilung des Stadiums der Gonadenentwicklung |
| Anlage 8 |
| Anlage 9 Leitlinien zur Bestimmung des genetischen Geschlechts mit Gewebeproben und durch Polymerase-Kettenreaktion |
| Anlage 10 Leitlinien zur Herstellung von Gewebeproben zur Bestimmung des genetischen Geschlechts durch PCR beim Dreistachligen Stichling |
| Anlage 11 Leitlinien zur künstlichen Befruchtung bei Dreistachligen Stichlingen |
| C.42 Biologische Abbaubarkeit in Meerwasser |
| Allgemeine Einleitung |
| Wahl der Methoden |
| Tabelle Vorteile und Nachteile des Schüttelkolben-Tests und des geschlossenen Flaschentests |
| Schüttelmethode |
| Einleitung |
| Prinzip der Methode |
| Informationen zum Prüfstoff |
| Referenzstoffe |
| Reproduzierbarkeit und Empfindlichkeit der Methode |
| Beschreibung der Methode |
| Daten und Berichterstattung |
| Geschlossener Flaschen-Test |
| Einleitung |
| Prinzip der Methode |
| Informationen zum Prüfstoff |
| Referenzstoffe |
| Reproduzierbarkeit |
| Beschreibung der Methode |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Bestimmung des Gehalts an organischem Kohlenstoff in Meerwasser |
| Anlage 2 Biologischer abbau in Meerwasser |
| Anlage 3 Berechnung des theoretischen biochemischen Sauerstoffbedarfs |
| Anlage 4 |
| Anlage 5 Biologischer Abbau in Meerwasser |
| C.43 Anaerobe biologische Abbaubarkeit organischer Stoffe in Faulschlamm: Bestimmung durch Messung der Gasproduktion |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Informationen zum Prüfstoff |
| Anwendbarkeit der Prüfmethode |
| Referenzstoffe |
| Reproduzierbarkeit von Prüfergebnissen |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Prüfverfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlagen |
| Anlage 1 Beispiel einer Apparatur zur Messung der Biogasproduktion anhand des Gasdrucks |
| Anlage 2 Umrechnung der Messwerte des Druckmessers |
| Anlage 3 Beispiel einer Abbaukurve (Kumulativer Netto-Druckanstieg) |
| Anlage 4 Datenblätter zur Prüfung der anaeroben biologischen Abbaubarkeit (Beispiel) - Datenblatt zum Prüfstoff |
| C.44 Versickerung in Bodensäulen |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Anwendbarkeit der Prüfmethode |
| Informationen zur Prüfchemikalie |
| Referenzchemikalien |
| Begriffsbestimmungen und Einheiten |
| Qualitätskriterien |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Tabelle 1: Leitlinien zur Auswahl von Böden für Versickerungsstudien |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen und Einheiten |
| Anlage 2 |
| Anlage 3 Relative Mobilitätsfaktoren * (RMF) der Chemikalien einiger Pflanzenschutzmittel (Beispiele) (1)(2) und entsprechende Mobilitätsklassen + |
| C.45 Abschätzung der Emissionen von mit Holzschutzmitteln behandeltem Holz in die Umwelt: Labormethode für unbeschichtete Holzprodukte, die mit Süsswasser oder mit Meerwasser in Berührung kommen |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Qualitätskriterien |
| Prüfbedingungen |
| Schutzbehandlung |
| Messung der von den Holzschutzmitteln ausgehenden Emissionen |
| Emissionsmessungen |
| Daten und Berichterstattung |
| Literatur |
| Anlage 1 Berichtsformular für das Prüfverfahren |
| Anlage 2 Begriffsbestimmungen |
| C.46 Bioakkumulation in sedimentbewohnenden benthischen Oligochaeten |
| Einleitung |
| Voraussetzungen und Informationen zum Prüfstoff |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Validität des Tests |
| Beschreibung der Methode |
| Durchführung der Prüfung |
| Daten und Berichterstattung |
| Anlagen |
| Anlage 1 Begriffsbestimmungen und Einheiten |
| Anlage 2 Berechnung der Aufnahme- und Eliminationsparameter |
| Anlage 3 Beispiel eines Probenahmeplans bei einem 28-Tägigen Bioakkumulationstest |
| a) Aufnahmephase (einschließlich einer 4-tägigen Equilibrierungsphase) |
| b) Eliminationsphase |
| Anlage 4 Einige physikalisch-chemische Eigenschaften eines geeigneten Verdünnungswassers |
| Anlage 5 Künstliches Sediment - Empfehlungen für die Herstellung und Lagerung |
| Anlage 6 Empfohlene Oligochaeten-Arten für Bioakkumulationstests |
| Literatur |
| C.47 Toxizitätsprüfung an Fischen im frühen Entwicklungsstadium |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Angaben zur Prüfchemikalie |
| Validität der Prüfung |
| Beschreibung der Methode |
| Durchführung des Tests |
| Daten und Berichterstattung |
| Tabelle 1 Für die Prüfung empfohlene Fischarten |
| Literaturhinweise |
| Anlagen |
| Anlage 1 Definitionen |
| Abbildung 1 Beschreibung der verschiedenen verwendeten Längen |
| Anlage 2 Prüfbedingungen, Dauer und Überlebenskriterien für empfohlene Fischarten |
| Anlage 3 Leitlinie zur Fütterung und Handhabung von Zucht- und Prüftieren der empfohlenen Arten |
| Anlage 4 Chemische Eigenschaften eines geeigneten Verdünnungswasssers |
| Anlage 5 Leitlinie für die statistische Analyse der NOEC-Bestimmung |
| Tabelle 1 90. Perzentil der Variationskoeffizienten für ausgewählte Süßwasserarten |
| Abbildung 2 NOEC-Flussdiagramm für Größenmessungen (Länge und Gewicht) |
| Formel 1 Tarone-C(α)-Test (Tarone 1979) |
| Abbildung 3 NOEC-Flussdiagramm für Schlupferfolg und Larvenmortalität |
| Literaturhinweise |
| Anlage 6 Leitlinie für statistische Regressionsanalysen |
| Abbildung 4 Flussdiagramm für die Schätzung der ECx für die mittlere Länge, das mittlere Gewicht und den mittleren Anteil an geschlüpften Eiern oder toten Larven je Replikat (Erläuterungen im Text) |
| Literaturhinweise |
| C.48 Kurzzeit-Reproduktionstest an Fischen |
| Einleitung |
| Ausgangsüberlegungen und Begrenzungen |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Gültigkeitskriterien |
| Beschreibung der Methode |
| Versuchsplan |
| Verfahren |
| Daten und Berichterstattung |
| Leitlinien für die Auswertung und Akzeptanz der Testergebnisse |
| Literaturhinweise |
| Anlagen |
| Anlage 1 Abkürzungen und Definitionen |
| Anlage 2 Versuchsbedingungen für den Fisch-Screening-Test zur Bestimmung endokriner Wirkungen |
| Anlage 3 Chemische Merkmale eines geeigneten Verdünnungswassers |
| Anlage 4A Laichsubstrat für Zebrabärblinge |
| baichsubstrat für Dickkopfelritzen |
| Anlage 5A Bewertung der sekundären Geschlechtsmerkmale bei Dickkopfelritzen zum Nachweis bestimmter Chemikalien mit endokriner Wirkung |
| Abbildung 1 |
| Literaturhinweise |
| Anlage 5B Bewertung der sekundären Geschlechtsmerkmale bei japanischen Reiskärpflingen zum Nachweis bestimmter Chemikalien mit endokriner Wirkung |
| Abb. 1 Schaubild zur Veranschaulichung der an Form und Größe der Afterflosse erkennbaren Geschlechtsunterschiede; a - männlich; B - weiblich. Oka, T. B., 1931 |
| Abb. 2 a - Prozesse auf verbundenen Afterflossenplatten. J.P. - verbundene Platte; A.S. - axialer Bereich; P - Prozess. B - Distales Ende des Flossenstrahls; Actinotrichien (Act.) an der Spitze; Oka, T. B., 1931 |
| Abb. 3 Foto eines Fischkörpers mit Schnittstelle bei Fixierung der Gonaden in einer anderen Fixierlösung als 10 %iges neutral gepuffertes Formalin |
| Anlage 6 Empfohlene Verfahren für die Entnahme von Proben für die Vitellogenin-Analyse |
| Verfahren 1A: Dickkopfelritze, Blutentnahme aus der Schwanzvene/-arterie |
| Verfahren 1B: Dickkopfelritze, Blutentnahme aus dem Herzen |
| Verfahren 2A: Japanische Reiskärpflinge, Exzision der Leber |
| Abb. 1 Unmittelbar vor den Brustflossen einen Schereneinschnitt vornehmen |
| Abb. 2 Auf der Bauchmittellinie bis zu einem Punkt etwa 2 mm kranial vor dem After einen Scherenschnitt durchführen |
| Abb. 3 Die Bauchwände mit einer Pinzette spreizen, um die Leber und die anderen inneren Organe freizulegen |
| Abb. 4 Die Leber grob sezieren und mit einer Pinzette entnehmen |
| Abb. 5 Darm mit der Pinzette vorsichtig herausziehen |
| Abb. 6 Beide Darmenden und etwaiges mesenteriales Gewebe mit einer Schere durchtrennen |
| Abb. 7 (Weibchen) Das Verfahren ist bei männlichen und weiblichen Fischen dasselbe |
| Abb. 8 Verfahren abgeschlossen |
| Verfahren 2B: Japanische Reiskärpflinge (Oryzias latipes), Vorbehandlung der Leber für die Vitellogenin-Analyse |
| Verfahren 3A: Zebrabärblinge, Blutentnahme aus der Schwanzvene/-arterie |
| Verfahren 3B: Zebrabärblinge, Blutentnahme durch Herzpunktion |
| Verfahren 3C: Standardarbeitsverfahren (SOP): Zebrabärblinge, Homogenisierung von Kopf- und Schwanzgewebe |
| Abbildung 1 |
| Anlage 7 Vitellogenin-angereicherte Proben und Inter-Assay-Referenzstandard |
| Anlage 8 Flussdiagramm als Entscheidungshilfe für die statistische Analyse |
| C.49 Prüfung auf akute Toxizität an Fischembryonen (FET) |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Ausgangsüberlegungen |
| Validität der Prüfung |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Verfahren |
| Tabelle 1 Apikale Beobachtungen der akuten Toxizität in Zebrabärblingsembryonen 24 bis 96 Stunden nach der Befruchtung |
| Daten und Berichterstattung |
| Literaturhinweise |
| Anlagen |
| Anlage 1 Definitionen |
| Anlage 2 Versuchsbedingungen für den Fisch-Screening-Test zur Bestimmung endokriner Wirkungen |
| Anlage 3 Normale Entwicklung von Zebrabärblingen bei 26 °C |
| Abb. 1: Ausgewählte Stufen der frühen Entwicklung von Zebrabärblingen(Danio rerio) |
| Abb. 2: Ausgewählte Stufen der späten Entwicklung von Zebrabärblingen(Danio rerio) (entchorionierter Embryo zur besseren Veranschaulichung) |
| Abb. 3: Normale Entwicklung von Zebrabärblingsembryonen(Danio rerio) |
| Anlage 4 |
| Abb. 1 Einteilung von 24-Well-Platten |
| Abb. 2 Schema der Toxizitätsprüfung an Embryonen von Zebrabärblingen (von links nach rechts) |
| Anlage 5 Atlas der letalen Endpunkte für die Prüfung auf akute Toxizität an Embryonen von Zebrabärblingen |
| Abb. 1 Koagulation des Embryos |
| Abb. 2 Fehlende Somitenbildung |
| Abb. 3 Fehlende Abtrennung der Schwanzknospe in der Seitenansicht |
| Abb. 4 Fehlender Herzschlag |
| C.50 Sedimentfreier Myriophyllum spicatum-Toxizitätstest |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Angaben zur Prüfchemikalie |
| Validität des Tests |
| Referenzchemikalie |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Daten und Berichterstattung |
| Literaturhinweise |
| Anlagen |
| Bnitionen |
| Anlage 2 Modifiziertes Andrews-Medium für Stamm- und Vorkultur |
| Tabelle 1 Zusammensetzung der Andrews-Nährlösung: (ASTM Designation E 1913-04) |
| Tabelle 2 Herstellung der Stammlösung 3.1 für die Zubereitung der Stammlösung 3 |
| Anlage 3 Haltung der Stammkultur |
| Abbildung 1 Schneiden der Pflanzen für die Stamm- und Vorkultur nach 3 Wochen Kultivierung |
| Abbildung 2 Kultivierung der Pflanzen in einem Kühlinkubator mit Kammerbeleuchtung |
| Anlage 4 Haltung der Vorkultur und Vorbereitung des Testorganismus für den Test |
| Abbildung 2 Schneiden der Pflanzen aus der Vorkultur für den sedimentfreien Myriophyllum spicatum-Toxizitätstest |
| C.51 Myriophyllum spicatum-Toxizitätstest im Wassersediment |
| Einleitung |
| Prinzip der Prüfmethode |
| Angaben zur Prüfchemikalie |
| Validität des Tests |
| Referenzchemikalie |
| Beschreibung der Prüfmethode |
| Testverfahren |
| Tabelle 1 Bewertungsplan |
| Auswertung der Daten |
| Berichterstattung |
| Literaturhinweise |
| Anlage 1 Zusammensetzung des Smart & Barko-Mediums |
| Anlage 2 Defintionen |
| C.52 Medaka erweiterte 1-Generationen-Reproduktionstest (MEOGRT) |
| C.53 The Larval Amphibian Growth and Developmen Assay (LAGDA) |